সরাসরি RT-qPCR কিট III
কিট বর্ণনা:
◮ডিরেক্ট RT-qPCR কিট, Foreasy Reverse Transcriptase এবং Foreasy HS Taq DNA পলিমারেজ ফোরজিন দ্বারা ডেভেলপ করা, অনন্য প্রতিক্রিয়া বাফার সহ, এই কিটটিকে শক্তিশালী প্রতিরোধ এবং সামঞ্জস্যের সাথে তৈরি করে এবং এটি সরাসরি প্রতিক্রিয়া পরীক্ষা করতে পারে Foregene Lysis সিস্টেমকে টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহার করে।এই কিটটি COVID-19 নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ কিট এবং অন্যান্য প্যাথোজেনিক ব্যাকটেরিয়া নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ কিট বিকাশের জন্য আবেদন করতে পারে।
বর্ণনা
ডাইরেক্ট RT-qPCR কিট আলাদাভাবে প্যাকেজ করা RT-qPCR বাফার প্রদান করে (Freasy HS Taq DNA পলিমারেজ মিশ্রিত) এবং উচ্চ দক্ষফোরজি রিভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেজ (MMLV),সহজ যাচাইয়ের মধ্যেই ব্যাক-এন্ড কিট তৈরি এবং সিস্টেম সামঞ্জস্য করার জন্য এটি সুবিধাজনক করে তোলে।
ডিরেক্ট RT-qPCR কিট, Foreasy Reverse Transcriptase এবং Foreasy HS Taq DNA পলিমারেজ ফোরজিন দ্বারা ডেভেলপ করা, অনন্য প্রতিক্রিয়া বাফার সহ, এই কিটটিকে শক্তিশালী প্রতিরোধ এবং সামঞ্জস্যের সাথে তৈরি করে এবং এটি সরাসরি প্রতিক্রিয়া পরীক্ষা করতে পারে Foregene Lysis সিস্টেমকে টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহার করে।এই কিটটি COVID-19 নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ কিট এবং অন্যান্য প্যাথোজেনিক ব্যাকটেরিয়া নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ কিট বিকাশের জন্য আবেদন করতে পারে।
সহজে এবং দ্রুত ব্যবহার করে এই কিটটি সরাসরি IVD পণ্যের উপাদান হতে পারে।এটি আবার বিকাশ না করে শুধুমাত্র সহজ যাচাইকরণ প্রয়োজন।
স্পেসিফিকেশন
500T, 50,000T
কিট উপাদান
| কিট বিষয়বস্তু (20 μL প্রতিক্রিয়া সিস্টেম) | IM-05111-03 | IM-05112-03 |
| 500 টি | 50,000 টি | |
| ফরেসি আরইভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেস(200 ইউ/μL) | 50 μL×1 | 1 মি.লি×5 |
| 2× ডাইরেক্ট qPCRমিক্স-তাকমান | 1 মিলি × 5 | 500 মি.লি×1 |
| নির্দেশ | 1 | 1 |
অপারেটিং পদক্ষেপ
উত্তর: টেমপ্লেট এবং বিকারক প্রস্তুত করুন
1. প্রস্তুত RNA টেমপ্লেট প্রস্তুত করুন (আরএনএ টেমপ্লেট নিষ্কাশন এবং বিশুদ্ধ করতে ফোরজিন টোটাল আরএনএ আইসোলেশন কিট সিরিজের কিট ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়) বা নমুনা ক্র্যাকিং পণ্য (ফোরজিন লাইসিস সিস্টেম ব্যবহার করা বাঞ্ছনীয়), নির্দিষ্ট প্রাইমার (10 μM) এবং অন্যান্য প্রাসঙ্গিক ভোগ্য সামগ্রী, যন্ত্র।
2. 2× ডাইরেক্ট RT-qPCR বাফার, RNase-ফ্রি ddH2O এবং 20× ROX রেফারেন্স ডাই (যদি প্রয়োজন হয়) বরফের সাথে বক্সে রাখুন, এগুলোকে স্বাভাবিকভাবে গলিয়ে আলতো করে মিশিয়ে নিন।
বি: RT-qPCR সিস্টেম প্রস্তুত করা
প্রতিক্রিয়া সিস্টেমের প্রতিক্রিয়া বাফারের অর্ধেক আয়তন পান (উদাহরণস্বরূপ, যদি সিস্টেমের আয়তন 20 μL হয় তবে এটি 10 μL 2× ডাইরেক্ট RT-qPCR বাফার পেতে হবে). জন্যএনজাইমের অনুরূপ পরিমাণ, আমরা যে সুপারিশM-MLV: 10-30 U/20 μL প্রতিক্রিয়া সিস্টেম,তাকডিএনএ পলিমারেজ：1-2 U/20 μL প্রতিক্রিয়া সিস্টেমএটি আমাদের পরামর্শ, আপনার এটি পরীক্ষা এবং সামঞ্জস্য করা উচিত), RNA টেমপ্লেট, নির্দিষ্ট প্রাইমার এবং প্রোব যোগ করুন এবং RNase-Free ddH যোগ করুন2O থেকে 20 μL।RT-qPCR প্রতিক্রিয়া সিস্টেমের নির্দিষ্ট প্রস্তুতি নিম্নলিখিত টেবিল 1 উল্লেখ করা যেতে পারে.
সারণী 1 : RT-qPCR সিস্টেম প্রস্তুত করুন
| উপাদান | আয়তন | চূড়ান্ত ঘনত্ব |
| 2× ডাইরেক্ট RT-qPCR বাফার | 10 μL | 1× |
| ফোরজি রিভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেজ (MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA পলিমারেজ | 1-2 ইউ | |
| ফরোয়ার্ড প্রাইমার (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| বিপরীত প্রাইমার (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| প্রোব (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| টেমপ্লেট(RNA বা Lysate) | X μL | |
| 20× ROX রেফারেন্স ডাই | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| মোট আয়তন | 20 μL |
দ্রষ্টব্য: ফরোয়ার্ড প্রাইমার এবং রিভার্স প্রাইমার হল টার্গেট জিনের নির্দিষ্ট প্রাইমার।কিউপিসিআর সিস্টেমটি ব্যবহারিক পরীক্ষামূলক এবং পিসিআর মডেল অনুসারে সামঞ্জস্য করা যেতে পারে।বেশিরভাগ প্রাইমারের চূড়ান্ত ঘনত্বের জন্য আমরা 400nM সুপারিশ করি।প্রস্তুত ঘনত্ব এবং প্রস্তাবিত চূড়ান্ত ঘনত্ব অনুযায়ী নির্দিষ্ট প্রাইমার এবং প্রোবের ভলিউম সামঞ্জস্য করুন, দয়া করে।
1*: বিভিন্ন পরিমাণগত পিসিআর যন্ত্র অনুযায়ী ROX রেফারেন্স ডাই এর উপযুক্ত চূড়ান্ত ঘনত্ব নির্বাচন করুন।সাধারণ পরিমাণগত পিসিআর যন্ত্রগুলির সর্বোত্তম ROX রেফারেন্স ডাই ঘনত্ব নিম্নলিখিত সারণীতে দেখানো হয়েছে:
| পরিমাণগত পিসিআর যন্ত্র | ROX রেফারেন্স ডাই এর চূড়ান্ত ঘনত্ব |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/স্টেপ ওয়ান,ইত্যাদি | 1× (উদাহরণস্বরূপ, 20 μL প্রতিক্রিয়া সিস্টেমে 1μl 20×ROX রেফারেন্স ডাই যোগ করুন) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P এবং Mx4000, ইত্যাদি। | 0.5× (উদাহরণস্বরূপ, 20 μL প্রতিক্রিয়া সিস্টেমে 0.5μl 20×ROX রেফারেন্স ডাই যোগ করুন) |
| রোচে পিসিআর যন্ত্র, বায়ো-র্যাড পিসিআর যন্ত্র, এপেনডর্ফ পরিমাণগত পিসিআর যন্ত্র ইত্যাদি। | ROX রেফারেন্স ডাই ছাড়া |
স্টোরেজ এবং শেলফ লাইফ
কিটটি -20 ± 5℃ এ সংরক্ষণ করা উচিত।এটি অবিলম্বে -20℃ থার্মোস্ট্যাটিক রেফ্রিজারেটরে সংরক্ষণ করা উচিত।এটি উপযুক্ত অবস্থায় সংরক্ষণ করা হলে বৈধতা সময়কাল 2 বছর।
