প্রাণীর মোট আরএনএ বিচ্ছিন্নতা কিট প্রাণী টিস্যু এবং কোষের জন্য মোট আরএনএ নিষ্কাশন এবং পরিশোধন কিট
কিট বর্ণনা:
বিভিন্ন প্রাণীর টিস্যু থেকে দ্রুত এবং দক্ষতার সাথে উচ্চ-বিশুদ্ধতা এবং উচ্চ-মানের মোট RNA বের করুন।
আরএনএ অবক্ষয় নিয়ে চিন্তা করার দরকার নেই।পুরো সিস্টেমটি RNase-মুক্ত
ডিএনএ-ক্লিনিং কলাম ব্যবহার করে কার্যকরভাবে ডিএনএ অপসারণ করুন
DNase যোগ না করে DNA সরান
সহজ - সমস্ত অপারেশন ঘরের তাপমাত্রায় সম্পন্ন হয়
দ্রুত-অপারেশন 30 মিনিটের মধ্যে সম্পন্ন করা যেতে পারে
নিরাপদ—কোন জৈব বিকারক ব্যবহার করা হয় না
উচ্চ বিশুদ্ধতা—OD260/280≈1.8-2.1
কিট বর্ণনা
50 প্রস্তুতি, 200 প্রস্তুতি
এই কিট ব্যবহার করেস্পিন কলাম এবং সূত্রআমাদের কোম্পানি দ্বারা তৈরি করা হয়েছে, যা উচ্চ দক্ষতার সাথে বিভিন্ন প্রাণীর টিস্যু থেকে উচ্চ-বিশুদ্ধতা এবং উচ্চ-মানের মোট RNA বের করতে পারে। এটি একটি দক্ষ ডিএনএ-ক্লিনিং কলাম প্রদান করে, যা সহজেই সুপারনাট্যান্ট এবং টিস্যু লাইসেট থেকে জিনোমিক ডিএনএকে আলাদা এবং শোষণ করতে পারে, সহজ এবং সময় সাশ্রয় করে;RNA-শুধু কলাম দক্ষতার সাথে RNA আবদ্ধ করতে পারে এবং একটি অনন্য সূত্র প্রচুর নমুনা দিয়ে একই সাথে প্রক্রিয়া করা যেতে পারে।
পুরো সিস্টেমটি RNase-মুক্ত, যাতে নিষ্কাশিত RNA ক্ষয় না হয়;বাফার RW1, বাফার RW2 বাফার ওয়াশিং সিস্টেম, যাতে প্রাপ্ত আরএনএ প্রোটিন, ডিএনএ, আয়ন এবং জৈব যৌগ দূষণ মুক্ত থাকে।
কিট উপাদান
| পশু মোট RNA বিচ্ছিন্নতা কিট | ||
| কিট উপাদান | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 টি | 200 টি | |
| বাফার RL1* | 25 মিলি | 100 মিলি |
| বাফার RL2 | 15 মিলি | 60 মিলি |
| বাফার RW1* | 25 মিলি | 100 মিলি |
| বাফার RW2 | 24 মিলি | 96 মিলি |
| RNase-মুক্ত ddH2O | 10 মিলি | 40 মিলি |
| RNA-শুধু কলাম | 50 | 200 |
| ডিএনএ-ক্লিনিং কলাম | 50 | 200 |
| দিক - নির্দেশনা বিবরনী | 1 টুকরা | 1 টুকরা |
পণ্যের তথ্য
| বিন্যাস | স্পিন কলাম | পরিশোধন উপাদান | ফোরজিন কলাম, বিকারক |
| ফ্লাক্স | 1-24 নমুনা | প্রস্তুতি প্রতি সময় | ~30 মিনিট (24 নমুনা) |
| সেন্ট্রিফিউজ | ডেস্ক সেন্ট্রিফিউজ | পাইরোলাইসিস বিচ্ছেদ | কেন্দ্রাতিগ বিচ্ছেদ |
| নমুনা | প্রাণীর টিস্যু;কোষ | নমুনার পরিমাণ | টিস্যু: 10-20 মিলিগ্রাম;সেল:(1-5)×106 |
| ইলুশন ভলিউম | 50-200 μL | সর্বোচ্চ লোডিং ভলিউম | 850 μL |
বৈশিষ্ট্য ও সুবিধা
■ আরএনএ অবক্ষয় নিয়ে চিন্তা করার দরকার নেই;পুরো সিস্টেমটি RNase-মুক্ত
■ কার্যকরভাবে ডিএনএ-ব্যবহার করে ডিএনএ-ক্লিনিং কলাম অপসারণ করুন
■ DNase যোগ না করে DNA সরান
■ সহজ-সমস্ত অপারেশন ঘরের তাপমাত্রায় সম্পন্ন হয়
■ দ্রুত অপারেশন 30 মিনিটের মধ্যে সম্পন্ন করা যেতে পারে
■ নিরাপদ-কোন জৈব বিকারক প্রয়োজন নেই
■ উচ্চ বিশুদ্ধতা -OD260/280≈1.8-2.1
কিট অ্যাপ্লিকেশন
এটি বিভিন্ন তাজা বা হিমায়িত প্রাণীর টিস্যু বা সংষ্কৃত কোষ থেকে মোট RNA নিষ্কাশন এবং পরিশোধনের জন্য উপযুক্ত।
পণ্যের পরামিতি
■ ডাউনস্ট্রিম অ্যাপ্লিকেশন: ফার্স্ট-স্ট্র্যান্ড সিডিএনএ সংশ্লেষণ, আরটি-পিসিআর, আণবিক ক্লোনিং, নর্দান ব্লট ইত্যাদি।
■ নমুনা: প্রাণীর টিস্যু, সভ্য কোষ
■ ডোজ: টিস্যু 10-20mg, কোষ (2-5)×106
■ পরিশোধন কলামের সর্বোচ্চ ডিএনএ বাঁধাই ক্ষমতা: 80 μg
■ ইলিউশন ভলিউম: 50-200 μl
ডায়াগ্রাম
পশু মোট RNA বিচ্ছিন্নতা কিট চিকিত্সা 20mg
তাজা মাউস নমুনা, 5% বিশুদ্ধ মোট RNA 1% আগর নিন
গ্লাইকোজেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস
1: প্লীহা 2: কিডনি
3: লিভার 4: হার্ট
স্টোরেজ এবং শেলফ লাইফ
কিটটি 24 মাস ঘরের তাপমাত্রায় (15-25 ℃) বা 2-8 ℃ বেশি সময়ের জন্য সংরক্ষণ করা যেতে পারে।β- mercaptoethanol (ঐচ্ছিক) যোগ করার পর বাফার RL1 1 মাসের জন্য 4 ℃ এ সংরক্ষণ করা যেতে পারে।
উদ্ধৃত নিবন্ধ
1.IF:18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., et al.সেন্ট্রাল কম্পোজিট ডিজাইনের অপ্টিমাইজেশনের মাধ্যমে লিভার বেস এডিটিং এর জন্য mRNA-লোড করা লিপিড-লাইক ন্যানো পার্টিকেল।অ্যাড.ফাংশনমেটার2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068।
2.IF:18.187:He X, Hong W, Yang J, et al.থেরাপিউটিক স্টেম সেল প্রস্তুতিতে কোষের স্বতঃস্ফূর্ত অ্যাপোপটোসিস ফসফ্যাটিডিলসারিন মুক্তির মাধ্যমে ইমিউনোমোডুলেটরি প্রভাব প্রয়োগ করে।সিগন্যাল ট্রান্সডাক্ট টার্গেট থার।2021 জুলাই 14;6(1):270।doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.IF: 17.97: ডাই জেড, লিউ এইচ, লিয়াও জে, এবং অন্যান্য।N7-Methylguanosine tRNA পরিবর্তন অনকোজেনিক mRNA অনুবাদকে উন্নত করে এবং ইন্ট্রাহেপ্যাটিক কোলাঞ্জিওকার্সিনোমা অগ্রগতি প্রচার করে।মোল সেল।2021 জুলাই 29:S1097-2765(21)00555-4।doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.IF:9.225: Cao X, Shu Y, Chen Y, et al.Mettl14-মধ্যস্থিত m6A পরিবর্তন এন্ডোপ্লাজমিক রেটিকুলাম হোমিওস্ট্যাসিস বজায় রেখে লিভারের পুনর্জন্মকে সহজ করে।সেল মোল গ্যাস্ট্রোএন্টেরল হেপাটোল।2021;12(2):633-651।doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001।
জন্য RNA বিচ্ছিন্নতা কিট অন্যান্য নমুনা উত্সসহজ প্রাপ্য:
কোষ, উদ্ভিদ, ভাইরাল, রক্ত ইত্যাদি।
আরএনএ বের করা হয় না বা আরএনএ ফলন কম
প্রায়শই বিভিন্ন কারণ রয়েছে যা পুনরুদ্ধারের দক্ষতাকে প্রভাবিত করে, যেমন: টিস্যুর নমুনা আরএনএ বিষয়বস্তু, অপারেশনের পদ্ধতি, ইলুশন ভলিউম ইত্যাদি।
1. বরফ স্নান বা ক্রায়োজেনিক (4 °C) সেন্ট্রিফিউগেশন অপারেশন চলাকালীন সঞ্চালিত হয়েছিল।
সুপারিশ: পুরো প্রক্রিয়া জুড়ে ঘরের তাপমাত্রায় (15-25 ° C) কাজ করুন, বরফ স্নান করবেন না এবং কম তাপমাত্রায় সেন্ট্রিফিউজ করবেন না।
2. অনুপযুক্ত নমুনা সংরক্ষণ বা অত্যধিক নমুনা স্টোরেজ সময়।
প্রস্তাবনা: নমুনাগুলিকে -80 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করুন বা তরল নাইট্রোজেনে হিমায়িত করুন এবং বারবার ফ্রিজ-গলে ব্যবহার এড়ান;আরএনএ নিষ্কাশনের জন্য তাজা টিস্যু বা সংষ্কৃত কোষ ব্যবহার করার চেষ্টা করুন।
3. অপর্যাপ্ত নমুনা lysis.
সুপারিশ: টিস্যু সমজাতকরণ করার সময়, নিশ্চিত করুন যে টিস্যু পর্যাপ্তভাবে সমজাতীয় হয়েছে এবং টিস্যু কোষগুলি RNA প্রকাশের ব্যাখ্যা করার জন্য পর্যাপ্তভাবে বিভক্ত হয়েছে।
4. eluent সঠিকভাবে যোগ করা হয় না.
সুপারিশ: RNase-মুক্ত ddH নিশ্চিত করুন2শুদ্ধকরণ কলামের ঝিল্লির মাঝখানে ড্রপওয়াইজে O যোগ করা হয়।
5. পরম ইথানলের সঠিক আয়তন বাফার RL2 বা বাফার RW2 তে যোগ করা হয়নি।
সুপারিশ: নির্দেশাবলী অনুসরণ করুন, বাফার RL2 এবং Buffer RW2-এ পরম ইথানলের সঠিক ভলিউম যোগ করুন এবং কিট ব্যবহার করার আগে ভালভাবে মিশ্রিত করুন।
6. টিস্যু নমুনা ডোজ উপযুক্ত নয়.
সুপারিশ: 10-20 মিলিগ্রাম টিস্যু বা (1-5) × 10 ব্যবহার করুন6কোষ প্রতি 500 μl বাফার RL1, কারণ অত্যধিক টিস্যু ব্যবহারের ফলে RNA নিষ্কাশন হ্রাস হতে পারে।
7. অনুপযুক্ত ইলিউশন ভলিউম বা অসম্পূর্ণ ইলিউশন।
সুপারিশ: পরিশোধন কলামের ইলুশন ভলিউম 50-200 μl;ইলুশন প্রভাব সন্তোষজনক না হলে, প্রিহিটেড RNase-ফ্রি ddH যোগ করার পর ঘরের তাপমাত্রা বসানোর সময় বাড়ানোর পরামর্শ দেওয়া হয়।2ও, যেমন 5-10 মিনিটের জন্য।
8. বাফার RW2 ধোয়ার পরে পরিশোধন কলামে ইথানলের অবশিষ্টাংশ রয়েছে।
সুপারিশ: বাফার RW2 ধোয়ার পরে যদি ইথানলের অবশিষ্টাংশ থাকে, 1 মিনিটের জন্য খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশন, খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশন অপারেশনের সময় 2 মিনিটে বাড়ানো যেতে পারে, বা পর্যাপ্ত পরিমাণে ইথানল অবশিষ্টাংশ অপসারণের জন্য 5 মিনিটের জন্য শোধন কলামটি ঘরের তাপমাত্রায় স্থাপন করা যেতে পারে।
বিশুদ্ধ আরএনএ ক্ষয়প্রাপ্ত হয়
বিশুদ্ধ RNA এর গুণমান নমুনা সংরক্ষণ, RNase দূষণ এবং ম্যানিপুলেশন ইত্যাদি বিষয়গুলির সাথে সম্পর্কিত।
1. টিস্যুর নমুনা সময়মতো রাখা হয় না।
সুপারিশ: সংগ্রহের পর যদি টিস্যুর নমুনা বা কোষ সময়মতো ব্যবহার না করা হয়, তাহলে অবিলম্বে -80 ডিগ্রি সেলসিয়াস বা তরল নাইট্রোজেন তাপমাত্রায় ক্রায়োপ্রেসার করুন।আরএনএ বের করতে, যখনই সম্ভব একটি নতুন নেওয়া টিস্যু বা কোষের নমুনা ব্যবহার করুন।
2. টিস্যুর নমুনা বারবার ফ্রিজ-গলানো।
সুপারিশ: টিস্যুর নমুনা সংরক্ষণ করার সময়, সংরক্ষণের জন্য সেগুলিকে ছোট ছোট টুকরো করে কেটে ফেলা এবং নমুনার বারবার জমাট গলানো এবং RNA এর অবক্ষয় এড়াতে ব্যবহার করার সময় একটি টুকরো সরিয়ে ফেলা ভাল।
3. অপারেশনের সময় ডিসপোজেবল গ্লাভস, মাস্ক ইত্যাদি না পরে RNase চালু করা হয়েছে।
সুপারিশ: আরএনএ নিষ্কাশন পরীক্ষাগুলি আলাদা আরএনএ ম্যানিপুলেশন কক্ষে সর্বোত্তমভাবে করা হয় এবং পরীক্ষার আগে টেবিলটি সাফ করা হয়।
পরীক্ষার সময় ডিসপোজেবল গ্লাভস এবং মাস্ক পরুন যাতে RNase প্রবর্তনের ফলে RNA ক্ষয় কম হয়।
4. রিএজেন্ট ব্যবহারের সময় RNase দ্বারা দূষিত হয়।
সুপারিশ: সম্পর্কিত পরীক্ষার জন্য একটি নতুন প্রাণী মোট RNA বিচ্ছিন্নতা কিট দিয়ে প্রতিস্থাপন করুন।
5. RNA ম্যানিপুলেশনে ব্যবহৃত সেন্ট্রিফিউজ টিউব, টিপস ইত্যাদি RNase দ্বারা দূষিত।
সুপারিশ: নিশ্চিত করুন যে RNA নিষ্কাশনে ব্যবহৃত সেন্ট্রিফিউজ টিউব, টিপস, পাইপেট ইত্যাদি সবই RNase-মুক্ত।
বিশুদ্ধ প্রাপ্ত আরএনএ ডাউনস্ট্রিম পরীক্ষাগুলিকে প্রভাবিত করে
বিশুদ্ধকরণ কলাম দ্বারা বিশুদ্ধ RNA, যদি লবণ আয়ন, প্রোটিন সামগ্রী খুব বড় হয় তবে তা নিম্নধারার পরীক্ষাকে প্রভাবিত করবে, যেমন: বিপরীত প্রতিলিপি, নর্দান ব্লট এট আল।
1. নির্গত RNA-তে লবণ আয়নের অবশিষ্টাংশ থাকে।
সুপারিশ: নিশ্চিত করুন যে ইথানলের সঠিক ভলিউম বাফার RW2 এ যোগ করা হয়েছে এবং অপারেশনের জন্য নির্দেশিত সেন্ট্রিফিউগাল গতিতে 2টি পরিশোধন কলাম ধোয়ার কাজ সম্পাদন করুন;যদি কোনো লবণ আয়নের অবশিষ্টাংশ থাকে, তবে পরিশোধন কলামটি বাফার RW2-এ 5 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় রেখে দিন এবং লবণ দূষণকে সর্বাধিক অপসারণের জন্য সেন্ট্রিফিউগেশন করুন।
2. নির্গত RNA-তে ইথানলের অবশিষ্টাংশ।
সুপারিশ: নিশ্চিত করুন যে বাফার RW2 ধোয়ার পরে, অপারেশনের জন্য নির্দেশিত সেন্ট্রিফিউগেশন গতিতে খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশন অপারেশন করুন, যদি ইথানলের অবশিষ্টাংশ থাকে তবে খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশন অপারেশনের সময় 2 মিনিটে বাড়িয়ে দিন, অথবা টিউবেল ইথানল পুনঃস্থাপনের পর 5 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় রেখে দিন। আইডিইউ
