প্ল্যান্ট টোটাল আরএনএ আইসোলেশন কিট প্লাস টোটাল আরএনএ পিউরিফিকেটন কিট প্লান্টের জন্য পলিস্যাকারাইড এবং পলিফেনল সমৃদ্ধ
কিট বর্ণনা:
Cat.No.RE-05021/05022/05024
উচ্চ পলিস্যাকারাইড এবং পলিফেনল উপাদান ধারণকারী সাধারণ উদ্ভিদ নমুনা থেকে মোট RNA পরিশোধনের জন্য।
পলিস্যাকারাইড এবং পলিফেনলের উচ্চ সামগ্রী সহ উদ্ভিদের নমুনাগুলি থেকে দ্রুত উচ্চ-মানের মোট RNA বের করুন।
DNA-ক্লিনিং কলাম ব্যবহার করে RNase-মুক্ত
সহজ - সমস্ত অপারেশন ঘরের তাপমাত্রায় সম্পন্ন হয়
দ্রুত-অপারেশন 30 মিনিটের মধ্যে সম্পন্ন করা যেতে পারে
নিরাপদ—কোন জৈব বিকারক ব্যবহার করা হয় না 
স্পেসিফিকেশন
50 প্রস্তুতি, 200 প্রস্তুতি
কিটটি ফোরজিন দ্বারা তৈরি স্পিন কলাম এবং সূত্র ব্যবহার করে, যা উচ্চ পলিস্যাকারাইড বা পলিফেনল সামগ্রী সহ বিভিন্ন উদ্ভিদ টিস্যু থেকে দক্ষতার সাথে উচ্চ-বিশুদ্ধতা এবং উচ্চ-মানের মোট RNA বের করতে পারে।এটি ডিএনএ-ক্লিনিং কলাম প্রদান করে যা সহজেই সুপারনাট্যান্ট এবং টিস্যু লাইসেট থেকে জিনোমিক ডিএনএ অপসারণ করতে পারে।RNA-শুধু কলাম কার্যকরভাবে RNA আবদ্ধ করতে পারে।কিট একই সময়ে বিপুল সংখ্যক নমুনা প্রক্রিয়া করতে পারে।
পুরো সিস্টেমে RNase নেই, তাই বিশুদ্ধ RNA ক্ষয় হবে না।বাফার PRW1 এবং Buffer PRW2 নিশ্চিত করতে পারে যে প্রাপ্ত আরএনএ প্রোটিন, ডিএনএ, আয়ন এবং জৈব যৌগ দ্বারা দূষিত নয়।
কিট উপাদান
| বাফার পিএসএল 1, বাফার পিএস, বাফার পিএসএল 2 |
| বাফার PRW1, বাফার PRW2 |
| RNase-মুক্ত ddH2O, DNA-ক্লিনিং কলাম |
| RNA-শুধু কলাম |
বৈশিষ্ট্য ও সুবিধা
■ সম্পূর্ণ প্রক্রিয়া জুড়ে কক্ষ তাপমাত্রায় (15-25℃) অপারেশন, বরফ স্নান এবং নিম্ন তাপমাত্রা সেন্ট্রিফিউগেশন ছাড়া।
■ সম্পূর্ণ কিট RNase-মুক্ত, আরএনএ অবক্ষয় নিয়ে চিন্তা করার দরকার নেই।
■ পলিস্যাকারাইড এবং পলিফেনলের উদ্ভিদ নমুনা থেকে RNA পরিশোধনের জন্য বিশেষভাবে উপযুক্ত।
■ ডিএনএ-ক্লিনিং কলাম বিশেষভাবে ডিএনএর সাথে আবদ্ধ হয়, যাতে কিটটি ডিএনএজ যোগ না করেই জিনোমিক ডিএনএ দূষণ দূর করতে পারে।
■ উচ্চ RNA ফলন: RNA-শুধু কলাম এবং অনন্য সূত্র দক্ষতার সাথে RNA শুদ্ধ করতে পারে।
■ দ্রুত গতি: কাজ করা সহজ এবং 30 মিনিটের মধ্যে সম্পন্ন করা যেতে পারে।
■ নিরাপত্তা: কোন জৈব বিকারক প্রয়োজন নেই.
■ উচ্চ গুণমান: বিশুদ্ধ RNA টুকরা উচ্চ বিশুদ্ধতা, প্রোটিন এবং অন্যান্য অমেধ্য মুক্ত, এবং বিভিন্ন ডাউনস্ট্রিম পরীক্ষামূলক অ্যাপ্লিকেশন পূরণ করতে পারে।
পণ্যের পরামিতি
■ ডাউনস্ট্রিম অ্যাপ্লিকেশন: ফার্স্ট-স্ট্র্যান্ড সিডিএনএ সংশ্লেষণ, আরটি-পিসিআর, আণবিক ক্লোনিং, নর্দান ব্লট ইত্যাদি।
■ নমুনা: পলিস্যাকারাইড এবং পলিফেনলের তাজা বা হিমায়িত উদ্ভিদ টিস্যু
■ ডোজ: 50mg উদ্ভিদ টিস্যু
■ পরিশোধন কলামের সর্বোচ্চ RNA বাঁধাই ক্ষমতা: 80 μg
■ ইলিউশন ভলিউম: 50-200 μl
কিট অ্যাপ্লিকেশন
এটি উচ্চ পলিস্যাকারাইড এবং পলিফেনল সামগ্রী সহ তাজা বা হিমায়িত উদ্ভিদ টিস্যুর নমুনা (বিশেষত তাজা উদ্ভিদ পাতার টিস্যু) থেকে মোট RNA নিষ্কাশন এবং পরিশোধনের জন্য উপযুক্ত।
কর্মধারা
ডায়াগ্রাম
প্ল্যান্ট টোটাল আরএনএ আইসোলেশন কিট প্লাস পলিস্যাকারাইড এবং পলিফেনলের 50 মিলিগ্রাম তাজা পাতা প্রক্রিয়াজাত করেছে এবং ইলেক্ট্রোফোরেসিস দ্বারা 5% বিশুদ্ধ আরএনএ পরীক্ষা করা হয়েছে।
1: কলা
2: জিঙ্কগো
3: তুলা
4: ডালিম
স্টোরেজ এবং শেলফ লাইফ
এই কিটটি ঘরের তাপমাত্রায় (15-25℃) শুকনো অবস্থায় 24 মাসের জন্য সংরক্ষণ করা যেতে পারে;যদি এটি দীর্ঘ সময়ের জন্য সংরক্ষণ করার প্রয়োজন হয় তবে এটি 2-8℃ এ সংরক্ষণ করা যেতে পারে।
Buffer PSL1 β-mercaptoethanol যোগ করার পরে 1 মাসের জন্য 4℃ এ স্থাপন করা যেতে পারে (এটি পরীক্ষার একই সময়ে এটি যোগ করার সুপারিশ করা হয়)।
কলাম প্লাগ করা হয়েছে
কলাম প্লাগ করার পরে, RNA ফলন হ্রাস পায় বা এমনকি RNA শুদ্ধ করা অসম্ভব, এবং প্রাপ্ত RNA ভর কম হয়।
সাধারণ কারণ বিশ্লেষণ:
1. নমুনা বিরতি পুঙ্খানুপুঙ্খ নয়.
নমুনা ভাঙার ফলে ডিএনএ-ক্লিনিং কলাম সম্পূর্ণরূপে ব্লক হয়ে যায় না, আরএনএ ফলন এবং গুণমানকে প্রভাবিত করে।আমরা পর্যাপ্ত তরল নাইট্রোজেনে দ্রুত নাকাল অপারেশন করার পরামর্শ দিই যখন আপনি নমুনাগুলি ভেঙে ফেলবেন, নমুনা কোষ প্রাচীর, কোষের ঝিল্লি এবং অন্যান্য টিস্যু গুঁড়ো করার চেষ্টা করুন।পলিওল পলিস্যাকারাইডের উদ্ভিদের নমুনার জন্য, আমরা আপনাকে প্ল্যান্ট টোটাল আরএনএ আইসোলেশন কিট প্লাস ব্যবহার করার পরামর্শ দিই।
2. ডিএনএ-ক্লিনিং কলাম দিয়ে আলাদা করা নমুনা সুপারনাট্যান্টকে স্তন্যপান করার সময়, সম্ভাব্য কোষের খণ্ডিত অবক্ষেপ শ্বাস নেওয়া হতে পারে।
গৃহীত কোষ খণ্ডিত পলল RNA-শুধু কলামের কারণ হবে যা RNA শোষণ অপারেশন সঞ্চালিত হলে ব্লক করা হবে (ধাপ 6 দেখুন)।কোষের ধ্বংসাবশেষ চুষে নেওয়া এড়ানোর জন্য এই সুপারন্যাট্যান্ট স্তন্যপান করার সময় আমরা আপনাকে সাবধানে সুপারিশ করি।
3. নমুনা প্রাথমিক পরিমাণ খুব বেশি।
অত্যধিক নমুনা ব্যবহারের ফলে বাফার PSL1 দ্বারা অসম্পূর্ণ নমুনা বিভক্তকরণ বা অসম্পূর্ণ সেল লাইসিস হবে, যার ফলে পরিশোধনের সময় পরিশোধন কলামে বাধা সৃষ্টি হবে।প্ল্যান্ট টোটাল আরএনএ আইসোলেশন কিট প্রতিটি একক বিশুদ্ধ অপারেটিং নমুনা 50 মিলিগ্রাম।পলিওল পলিস্যাকারাইডের উদ্ভিদের নমুনার জন্য, আমরা সুপারিশ করি যে আপনি প্ল্যান্ট টোটাল আরএনএ আইসোলেশন কিট প্লাস ব্যবহার করে দেখুন।
4. সেন্ট্রিফিউজের তাপমাত্রা খুব কম।
সম্পূর্ণ আরএনএ বিচ্ছিন্নকরণ এবং পরিশোধন প্রক্রিয়া ঘরের তাপমাত্রায় (20-25°সি), নমুনা টিস্যু তরল নাইট্রোজেন দ্বারা ভাঙ্গা ছাড়া। কিছু ক্রায়োজেনিক সেন্ট্রিফিউজের তাপমাত্রা 20 এর চেয়ে কম℃, যা DNA-ক্লিনিং কলাম এবং/অথবা RNA-শুধু কলামে বাধা সৃষ্টি করতে পারে।যদি এটি ঘটে, সেন্ট্রিফিউজ তাপমাত্রা 20-25 এ সেট করুন℃, এবংনিশ্চিত করুন যে লাইসিস মিশ্রণ এবং/অথবা ইথানল-যুক্ত সুপারনাট্যান্ট 37-এ প্রিহিট করা হয়েছে°C.
কোন RNA নিষ্কাশিত বা RNA ফলন কম নয়
সাধারণত অনেকগুলি কারণ রয়েছে যা পুনরুদ্ধারের দক্ষতাকে প্রভাবিত করে, যেমন: নমুনা RNA বিষয়বস্তু, অপারেশন পদ্ধতি, ইলুশন ভলিউম ইত্যাদি।
নিম্নরূপ সাধারণ কারণ বিশ্লেষণ:
1.অপারেশনের সময় একটি বরফ স্নান বা নিম্ন তাপমাত্রা (4°C) সেন্ট্রিফিউগেশন করা হয়েছিল।
পরামর্শ: ঘরের তাপমাত্রায় কাজ করুন (15-25°গ) পুরো প্রক্রিয়ায়, বরফ স্নান এবং নিম্ন তাপমাত্রার সেন্ট্রিফিউগেশন করবেন না।
2. নমুনার অনুপযুক্ত সংরক্ষণ বা নমুনা দীর্ঘমেয়াদী সংরক্ষণের কারণে RNA ক্ষয়প্রাপ্ত হয়েছে।
সুপারিশ: সদ্য সংগ্রহ করা নমুনাগুলিকে দ্রুত তরল নাইট্রোজেনে হিমায়িত করা উচিত, এবং তারপরে -80 ডিগ্রি সেলসিয়াসে দীর্ঘ সময়ের জন্য সংরক্ষণ করা উচিত, নমুনাগুলি বারবার জমা করা এবং গলানো এড়িয়ে চলুন;অথবা অবিলম্বে RNA স্টেবিলাইজার RNAlater সলিউশনে (প্রাণীর নমুনা) নমুনা ভিজিয়ে রাখুন।
3. অপর্যাপ্ত নমুনা ফ্র্যাগমেন্টেশন এবং লাইসিস পরিশোধন কলামে বাধা সৃষ্টি করে।
পরামর্শ: টিস্যু গ্রাইন্ড করার সময়, অনুগ্রহ করে নিশ্চিত করুন যে টিস্যুটি পর্যাপ্ত পরিমাণে মাটিতে রয়েছে এবং দ্রুত এটিকে পূর্ব-প্রস্তুত বাফার PSL1 এ স্থানান্তর করুন (নিশ্চিত করুন যে β-ME এর সঠিক অনুপাত যোগ করা হয়েছে, পদ্ধতির 1 ধাপ দেখুন)।
4. eluent ভুলভাবে যোগ করা হয়েছে.
পরামর্শ: নিশ্চিত করুন যে RNase-মুক্ত ddH2O পরিশোধন কলামের ঝিল্লির মাঝখানে ড্রপ করা হয়েছে।
5. পরম ইথানলের সঠিক ভলিউম বাফার PSL2 বা বাফার PRW2 তে যোগ করা হয়নি।
পরামর্শ: অনুগ্রহ করে নির্দেশাবলী অনুসরণ করুন, বাফার PSL2 এবং Buffer PRW2-এ পরম ইথানলের সঠিক ভলিউম যোগ করুন এবং কিট ব্যবহার করার আগে ভালভাবে মিশ্রিত করুন।
6. টিস্যুর নমুনার পরিমাণ অনুপযুক্ত।
পরামর্শ: বাফার PSL1 এর 500 μl প্রতি 50 মিলিগ্রাম টিস্যু ব্যবহার করুন।অত্যধিক টিস্যু ব্যবহার করলে নিষ্কাশিত RNA এর পরিমাণ কমে যাবে এবং ফলে RNA এর বিশুদ্ধতাও কমে যাবে।আমরা দৃঢ়ভাবে সুপারিশ করি যে প্রাথমিক নমুনা ডোজ RNA নিষ্কাশন অপারেশন প্রতি 50 মিলিগ্রামের বেশি হওয়া উচিত নয়।
7. অনুপযুক্ত ইলিউশন ভলিউম বা অসম্পূর্ণ ইলুশন।
পরামর্শ: পরিশোধন কলামের ইলুয়েন্ট ভলিউম 50-200 μl;ইলুশন প্রভাব সন্তোষজনক না হলে, প্রিহিটেড RNase-ফ্রি ddH2O যোগ করার পর ঘরের তাপমাত্রায় সময় বাড়ানোর পরামর্শ দেওয়া হয়, যেমন 5-10 মিনিট।
8. BufferPRW2 দিয়ে ধোয়ার পর পরিশোধন কলামে ইথানলের অবশিষ্টাংশ থাকে।
পরামর্শ: যদি খালি টিউবটি 1 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করা হয় এবং বাফার PRW2-তে ধোয়ার পরেও ইথানল অবশিষ্ট থাকে, তাহলে আপনি খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশনের সময় 2 মিনিটে বাড়িয়ে দিতে পারেন, বা অবশিষ্ট ইথানল সম্পূর্ণরূপে অপসারণের জন্য 5 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় পরিশোধন কলাম রাখতে পারেন।
9. কিটটি ভুলভাবে ব্যবহার করা হয়েছিল।
পরামর্শ: পলিফেনলিক পলিস্যাকারাইডের উদ্ভিদ নমুনার জন্য, সাধারণ কিট ব্যবহার করে যেমন প্ল্যান্ট টোটাল আরএনএ আইসোলেশন কিট আদর্শ আরএনএ নমুনা পেতে সক্ষম নাও হতে পারে।আমরা আপনাকে প্ল্যান্ট টোটাল আরএনএ আইসোলেশনকিট প্লাস ব্যবহার করার পরামর্শ দিই, যা বিশেষভাবে পলিফেনলিক পলিস্যাকারাইড উদ্ভিদের নমুনার জন্য ডিজাইন করা হয়েছে।পলিফেনল এবং পলিস্যাকারাইড উদ্ভিদের নমুনা থেকে আরএনএ বের করার জন্য বিশেষভাবে একটি কিট তৈরি করা হয়েছে।
OD260/OD280 মান কম
ddH2O সহ আরএনএ ইলুশন এবং স্পেকট্রোফোটোমিটার রিডিংয়ের জন্য ব্যবহার করা হলে OD260/OD280 মান কম হয়।তুলনামূলকভাবে সঠিক OD260/OD280 মান পেতে আমরা 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (RNase-মুক্ত ddH2O এর পরিবর্তে) ব্যবহার করার পরামর্শ দিই, পৃষ্ঠা 19-এ "RNA ঘনত্ব এবং পরিশোধন পরীক্ষা" দেখুন।
বিশুদ্ধ আরএনএ ক্ষয়প্রাপ্ত হয়
বিশুদ্ধ RNA-এর গুণমান নমুনা সংরক্ষণ, RNase দূষণ এবং ম্যানিপুলেশনের মতো বিষয়গুলির সাথে সম্পর্কিত।
সাধারণ কারণ বিশ্লেষণ:
1. টিস্যু নমুনা সংগ্রহের পরে সময়মতো সংরক্ষণ করা হয়নি।
প্রস্তাবনা: সংগ্রহের পরে যদি টিস্যুর নমুনাগুলি সময়মতো ব্যবহার না করা হয়, অনুগ্রহ করে তাৎক্ষণিকভাবে কম তাপমাত্রায় তরল নাইট্রোজেনে সংরক্ষণ করুন বা তরল নাইট্রোজেনে দ্রুত জমাট বাঁধার পরে দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজের জন্য -80 ডিগ্রি সেলসিয়াসে স্থানান্তর করুন, বা অবিলম্বে নমুনাগুলিকে RNA স্টেবিলাইজার RNAlater সলিউশনে (প্রাণীর নমুনা) নিমজ্জিত করুন।RNA নিষ্কাশনের জন্য, সদ্য সংগ্রহ করা টিস্যু নমুনা ব্যবহার করার চেষ্টা করুন।
2. টিস্যুর নমুনা বারবার জমা করা এবং গলানো।
পরামর্শ: টিস্যুর নমুনা সংরক্ষণ করার সময়, সংরক্ষণের জন্য সেগুলিকে ছোট ছোট টুকরো করে কেটে নেওয়া ভাল, এবং বারবার জমাট বাঁধা এবং নমুনাগুলি গলানোর ফলে সৃষ্ট RNA-এর অবক্ষয় এড়াতে ব্যবহার করার সময় তাদের একটি অংশ বের করে নেওয়া ভাল।
3.RNase অপারেশন রুমে প্রবর্তন করা হয় বা ডিসপোজেবল গ্লাভস, মাস্ক ইত্যাদি পরিধান করা হয় না।
পরামর্শ: RNA নিষ্কাশন পরীক্ষাগুলি পৃথক RNA অপারেশনে সর্বোত্তমভাবে সঞ্চালিত হয়, এবং পরীক্ষাগারের টেবিলটি পরীক্ষার আগে পরিষ্কার করা উচিত, এবং RNase এর প্রবর্তনের ফলে RNA ক্ষয় এড়াতে পরীক্ষার সময় নিষ্পত্তিযোগ্য গ্লাভস এবং মুখোশ পরিধান করা উচিত।
4. রিএজেন্ট ব্যবহারের সময় RNase দ্বারা দূষিত হয়।
পরামর্শ: সম্পর্কিত পরীক্ষার জন্য উদ্ভিদের মোট RNA নিষ্কাশন কিটগুলির একটি নতুন সিরিজ দিয়ে প্রতিস্থাপন করুন।
5. RNA ম্যানিপুলেশনের জন্য ব্যবহৃত সেন্ট্রিফিউজ টিউব এবং পাইপেট টিপস RNase দ্বারা দূষিত।
পরামর্শ: নিশ্চিত করুন যে RNA নিষ্কাশনে ব্যবহৃত সেন্ট্রিফিউজ টিউব, পাইপেট টিপস, পাইপেট ইত্যাদি সবই RNase-মুক্ত।
নির্দেশিকা ম্যানুয়াল:
প্ল্যান্ট টোটাল আরএনএ আইসোলেশন কিট প্লাস নির্দেশিকা ম্যানুয়াল
