সেল টোটাল আরএনএ আইসোলেশন কিট সেল থেকে মোট আরএনএ আইসোলেশন পিউরিফিকেশন কিট
কিট বর্ণনা:
11 মিনিটের মধ্যে বিভিন্ন সংস্কৃত কোষ থেকে উচ্চ শুদ্ধ এবং উচ্চ-মানের মোট RNA পাওয়া যায়।
RNase-মুক্ত
ঘরের তাপমাত্রায় পরিচালিত হয় (15-25℃)
ডিএনএ-ক্লিনিং কলাম সহ
উচ্চ RNA ফলন
দ্রুত: 11 মিনিটের মধ্যে নিষ্কাশন শেষ করুন
নিরাপত্তা: কোনো জৈব রাসায়নিক নয়
বর্ণনা
এই কিটটি ফোরজিন দ্বারা বিকশিত স্পিন কলাম এবং সূত্র ব্যবহার করে, যা 96, 24, 12 এবং 6-ওয়েল প্লেটে সংষ্কৃত কোষ থেকে দক্ষতার সাথে উচ্চ-বিশুদ্ধতা এবং উচ্চ-মানের মোট RNA বের করতে পারে।
কিটটি একটি দক্ষ ডিএনএ-ক্লিনিং কলাম প্রদান করে, যা সহজেই সুপারনাট্যান্ট এবং সেল লাইসেটকে আলাদা করতে পারে, জিনোমিক ডিএনএকে আবদ্ধ ও অপসারণ করতে পারে।অপারেশন সহজ এবং সময় সাশ্রয়ী.
Tশুধুমাত্র RNA-র কলাম দক্ষতার সাথে RNA কে একটি অনন্য সূত্র দিয়ে আবদ্ধ করতে পারে।নমুনা একটি বড় সংখ্যা একযোগে প্রক্রিয়া করা যেতে পারে.
কিট উপাদান
| কিট রচনা | RE-03111 | RE-03114 |
| 50 টি | 200 টি | |
| বাফার cRL1* | 25 মিলি | 100 মিলি |
| বাফার cRL2 | 15 মিলি | 60 মিলি |
| বাফার RW1* | 25 মিলি | 100 মিলি |
| বাফার RW2 | 24 মিলি | 96 মিলি |
| RNase-মুক্ত ddH2O | 10 মিলি | 40 মি.লি |
| RNA-শুধু কলাম | 50 | 200 |
| ডিএনএ-ক্লিনিং কলাম | 50 | 200 |
| নির্দেশ | 1 | 1 |
*অপারেশনের সময় অনুগ্রহ করে গ্লাভস পরিধান করুন এবং প্রতিরক্ষামূলক ব্যবস্থা নিন কারণ Buffer cRL1 এবং Buffer RW1-এ বিরক্তিকর ক্যাওট্রপিক লবণ থাকে।
বৈশিষ্ট্য ও সুবিধা
■ পুরো প্রক্রিয়াটি কক্ষ তাপমাত্রায় (15-25℃), বরফ স্নান এবং নিম্ন তাপমাত্রা কেন্দ্রীকরণ ছাড়াই পরিচালিত হয়।
■ পুরো কিটটি RNase-মুক্ত, আরএনএ অবক্ষয় নিয়ে চিন্তা করার দরকার নেই।
■ ডিএনএ-ক্লিনিং কলাম বিশেষভাবে ডিএনএকে আবদ্ধ করে, যাতে কিট অতিরিক্ত ডিএনএ যোগ না করেই জিনোমিক ডিএনএ দূষণ দূর করতে পারে।
■ উচ্চ RNA ফলন: RNA-শুধু কলাম এবং অনন্য সূত্র দক্ষতার সাথে RNA শুদ্ধ করতে পারে।
■ দ্রুত গতি: পরিচালনা করা সহজ এবং 11 মিনিটের মধ্যে সম্পন্ন করা যেতে পারে।
■ নিরাপত্তা: কোন জৈব বিকারক প্রয়োজন নেই.
■ উচ্চ গুণমান: বিশুদ্ধ RNA উচ্চ বিশুদ্ধ, প্রোটিন এবং অন্যান্য অমেধ্য মুক্ত, এবং পরবর্তী বিভিন্ন পরীক্ষা-নিরীক্ষা পূরণ করতে পারে।
কিট অ্যাপ্লিকেশন
এটি 96, 24, 12 এবং 6-ওয়েল প্লেটে সংস্কৃত কোষ থেকে মোট RNA নিষ্কাশন এবং পরিশোধনের জন্য উপযুক্ত।
কর্মধারা
ডায়াগ্রাম
সেল টোটাল আরএনএ আইসোলেশন কিটের অ্যাগারোজ জেল ব্যাটারি ডায়াগ্রামে উপরের বিভিন্ন সংখ্যক কোষের চিকিৎসা করা হয়েছে, 20μl ভলিউম ইলুশন, 2μl বিশুদ্ধ মোট RNA 1% নিন।
স্টোরেজ এবং শেলফ লাইফ
কিটটি 12 মাস ঘরের তাপমাত্রায় (15-25 ℃) বা 2-8 ℃ বেশি সময়ের জন্য (24 মাস) সংরক্ষণ করা যেতে পারে।
বাফার cRL1 2-hydroxy-1-ethanethiol (ঐচ্ছিক) যোগ করার পরে 1 মাসের জন্য 4 ℃ এ সংরক্ষণ করা যেতে পারে।
আরএনএ বের করা হয় না বা আরএনএ ফলন কম
প্রায়শই বিভিন্ন কারণ রয়েছে যা পুনরুদ্ধারের দক্ষতাকে প্রভাবিত করে, যেমন: টিস্যুর নমুনা আরএনএ বিষয়বস্তু, অপারেশনের পদ্ধতি, ইলুশন ভলিউম ইত্যাদি।
1. বরফ স্নান বা ক্রায়োজেনিক (4 °C) সেন্ট্রিফিউগেশন অপারেশন চলাকালীন সঞ্চালিত হয়েছিল।
সুপারিশ: পুরো প্রক্রিয়া জুড়ে ঘরের তাপমাত্রায় (15-25 ° C) কাজ করুন, বরফ স্নান করবেন না এবং কম তাপমাত্রায় সেন্ট্রিফিউজ করবেন না।
2. অনুপযুক্ত নমুনা সংরক্ষণ বা অত্যধিক নমুনা স্টোরেজ সময়।
প্রস্তাবনা: নমুনাগুলিকে -80 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করুন বা তরল নাইট্রোজেনে হিমায়িত করুন এবং বারবার ফ্রিজ-গলে ব্যবহার এড়ান;আরএনএ নিষ্কাশনের জন্য তাজা টিস্যু বা সংষ্কৃত কোষ ব্যবহার করার চেষ্টা করুন।
3. অপর্যাপ্ত নমুনা lysis.
সুপারিশ: টিস্যু সমজাতকরণ করার সময়, নিশ্চিত করুন যে টিস্যু পর্যাপ্তভাবে সমজাতীয় হয়েছে এবং টিস্যু কোষগুলি RNA প্রকাশের ব্যাখ্যা করার জন্য পর্যাপ্তভাবে বিভক্ত হয়েছে।
4. eluent সঠিকভাবে যোগ করা হয় না.
সুপারিশ: RNase-মুক্ত ddH নিশ্চিত করুন2শুদ্ধকরণ কলামের ঝিল্লির মাঝখানে ড্রপওয়াইজে O যোগ করা হয়।
5. পরম ইথানলের সঠিক আয়তন বাফার RL2 বা বাফার RW2 তে যোগ করা হয়নি।
সুপারিশ: নির্দেশাবলী অনুসরণ করুন, বাফার RL2 এবং Buffer RW2-এ পরম ইথানলের সঠিক ভলিউম যোগ করুন এবং কিট ব্যবহার করার আগে ভালভাবে মিশ্রিত করুন।
6. টিস্যু নমুনা ডোজ উপযুক্ত নয়.
সুপারিশ: 10-20 মিলিগ্রাম টিস্যু বা (1-5) × 10 ব্যবহার করুন6কোষ প্রতি 500 μl বাফার RL1, কারণ অত্যধিক টিস্যু ব্যবহারের ফলে RNA নিষ্কাশন হ্রাস হতে পারে।
7. অনুপযুক্ত ইলিউশন ভলিউম বা অসম্পূর্ণ ইলিউশন।
সুপারিশ: পরিশোধন কলামের ইলুশন ভলিউম 50-200 μl;ইলুশন প্রভাব সন্তোষজনক না হলে, প্রিহিটেড RNase-ফ্রি ddH যোগ করার পর ঘরের তাপমাত্রা বসানোর সময় বাড়ানোর পরামর্শ দেওয়া হয়।2ও, যেমন 5-10 মিনিটের জন্য।
8. বাফার RW2 ধোয়ার পরে পরিশোধন কলামে ইথানলের অবশিষ্টাংশ রয়েছে।
সুপারিশ: বাফার RW2 ধোয়ার পরে যদি ইথানলের অবশিষ্টাংশ থাকে, 1 মিনিটের জন্য খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশন, খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশন অপারেশনের সময় 2 মিনিটে বাড়ানো যেতে পারে, বা পর্যাপ্ত পরিমাণে ইথানল অবশিষ্টাংশ অপসারণের জন্য 5 মিনিটের জন্য শোধন কলামটি ঘরের তাপমাত্রায় স্থাপন করা যেতে পারে।
বিশুদ্ধ আরএনএ ক্ষয়প্রাপ্ত হয়
বিশুদ্ধ RNA এর গুণমান নমুনা সংরক্ষণ, RNase দূষণ এবং ম্যানিপুলেশন ইত্যাদি বিষয়গুলির সাথে সম্পর্কিত।
1. টিস্যুর নমুনা সময়মতো রাখা হয় না।
সুপারিশ: সংগ্রহের পর যদি টিস্যুর নমুনা বা কোষ সময়মতো ব্যবহার না করা হয়, তাহলে অবিলম্বে -80 ডিগ্রি সেলসিয়াস বা তরল নাইট্রোজেন তাপমাত্রায় ক্রায়োপ্রেসার করুন।আরএনএ বের করতে, যখনই সম্ভব একটি নতুন নেওয়া টিস্যু বা কোষের নমুনা ব্যবহার করুন।
2. টিস্যুর নমুনা বারবার ফ্রিজ-গলানো।
সুপারিশ: টিস্যুর নমুনা সংরক্ষণ করার সময়, সংরক্ষণের জন্য সেগুলিকে ছোট ছোট টুকরো করে কেটে ফেলা এবং নমুনার বারবার জমাট গলানো এবং RNA এর অবক্ষয় এড়াতে ব্যবহার করার সময় একটি টুকরো সরিয়ে ফেলা ভাল।
3. অপারেশনের সময় ডিসপোজেবল গ্লাভস, মাস্ক ইত্যাদি না পরে RNase চালু করা হয়েছে।
সুপারিশ: আরএনএ নিষ্কাশন পরীক্ষাগুলি আলাদা আরএনএ ম্যানিপুলেশন কক্ষে সর্বোত্তমভাবে করা হয় এবং পরীক্ষার আগে টেবিলটি সাফ করা হয়।
পরীক্ষার সময় ডিসপোজেবল গ্লাভস এবং মাস্ক পরুন যাতে RNase প্রবর্তনের ফলে RNA ক্ষয় কম হয়।
4. রিএজেন্ট ব্যবহারের সময় RNase দ্বারা দূষিত হয়।
সুপারিশ: সম্পর্কিত পরীক্ষার জন্য একটি নতুন প্রাণী মোট RNA বিচ্ছিন্নতা কিট দিয়ে প্রতিস্থাপন করুন।
5. RNA ম্যানিপুলেশনে ব্যবহৃত সেন্ট্রিফিউজ টিউব, টিপস ইত্যাদি RNase দ্বারা দূষিত।
সুপারিশ: নিশ্চিত করুন যে RNA নিষ্কাশনে ব্যবহৃত সেন্ট্রিফিউজ টিউব, টিপস, পাইপেট ইত্যাদি সবই RNase-মুক্ত।
বিশুদ্ধ প্রাপ্ত আরএনএ ডাউনস্ট্রিম পরীক্ষাগুলিকে প্রভাবিত করে
বিশুদ্ধকরণ কলাম দ্বারা বিশুদ্ধ RNA, যদি লবণ আয়ন, প্রোটিন সামগ্রী খুব বড় হয় তবে তা নিম্নধারার পরীক্ষাকে প্রভাবিত করবে, যেমন: বিপরীত প্রতিলিপি, নর্দান ব্লট এট আল।
1. নির্গত RNA-তে লবণ আয়নের অবশিষ্টাংশ থাকে।
সুপারিশ: নিশ্চিত করুন যে ইথানলের সঠিক ভলিউম বাফার RW2 এ যোগ করা হয়েছে এবং অপারেশনের জন্য নির্দেশিত সেন্ট্রিফিউগাল গতিতে 2টি পরিশোধন কলাম ধোয়ার কাজ সম্পাদন করুন;যদি কোনো লবণ আয়নের অবশিষ্টাংশ থাকে, তবে পরিশোধন কলামটি বাফার RW2-এ 5 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় রেখে দিন এবং লবণ দূষণকে সর্বাধিক অপসারণের জন্য সেন্ট্রিফিউগেশন করুন।
2. নির্গত RNA-তে ইথানলের অবশিষ্টাংশ।
সুপারিশ: নিশ্চিত করুন যে বাফার RW2 ধোয়ার পরে, অপারেশনের জন্য নির্দেশিত সেন্ট্রিফিউগেশন গতিতে খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশন অপারেশন করুন, যদি ইথানলের অবশিষ্টাংশ থাকে তবে খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশন অপারেশনের সময় বাড়িয়ে 2 মিনিট করুন, বা ঘরের তাপমাত্রায় 5 মিটার রেখে দিন।
