A260/A230 এর নিম্ন অনুপাত সাধারণত 230nm সর্বোচ্চ শোষণ তরঙ্গদৈর্ঘ্যের অমেধ্য দ্বারা সৃষ্ট হয়।আসুন দেখি এই অমেধ্যগুলি কী অন্তর্ভুক্ত:

• সাধারণ দূষণকারী	শোষণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য	অনুপাত প্রভাব
  প্রোটিন	~230nm এবং 280nm	A এর যুগপত হ্রাস260/A 280এবং এ260/A 280অনুপাত
  গুয়ানিডিন লবণ	220-240 এনএম	A কমিয়ে দিন260/A 280অনুপাত
  ফেনল	~270nm	-
  ট্রিজল	~230nm এবং 270nm	A কমিয়ে দিন260/A 280অনুপাত
  EDTA	~230nm	A কমিয়ে দিন260/A 280অনুপাত
  ইথানল	230-240 এনএম	A কমিয়ে দিন260/A 280অনুপাত

 
 
 
সাধারণ দূষণকারীর শোষণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য এবং বৈসাদৃশ্য মান

Pরোটিন দূষণ
প্রোটিন দূষণকে নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন প্রক্রিয়ার সবচেয়ে সাধারণ দূষণ হিসাবে বিবেচনা করা যেতে পারে।প্রোটিন উপরের জলীয় পর্যায় এবং নীচের মধ্যে বিদ্যমানজৈবপর্যায় .দূষণ একই সময়ে A260/A280 এবং A260/A230 এর অনুপাত কমিয়ে দেবে এবং A260/A230 এর অনুপাত A260/A280 এর অনুপাতের তুলনায় আরও স্পষ্টভাবে পরিবর্তিত হবে।
পরবর্তী সময়েবিপরীত প্রতিলিপিor qPCR প্রতিক্রিয়া, প্রোটিন অবশিষ্টাংশ এনজাইম ফাংশন বাধা বা হস্তক্ষেপ করতে পারে.প্রোটিন দূষণ এড়ানোর সর্বোত্তম উপায় হল সুপারন্যাট্যান্টের উচ্চাকাঙ্খী করার সময় "বেশির চেয়ে কম, অনেকবার অল্প পরিমাণ" নীতিটি মনে রাখা।

2. গুয়ানিডিনিয়াম দূষণ
হাইড্রোক্লোরাইড (GuHCl) এবং গুয়ানিডিন থায়োসায়ানেট (GTC) প্রোটিনকে বিকৃত করার প্রভাব রাখে, যা নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন প্রক্রিয়ার সময় কোষের ঝিল্লিকে দ্রুত ধ্বংস করতে পারে, যার ফলে প্রোটিন বিকৃত হয় এবং বৃষ্টিপাত হয়।GuHCl এবং GTC এর শোষণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য 220-240 এনএম, এবংঅবশিষ্ট গুয়ানিডিনিয়াম লবণ A260/A230 এর অনুপাত কমিয়ে দেবে.যদিও অবশিষ্ট গুয়ানিডিনিয়াম লবণ অনুপাত কমিয়ে দেবে,ডাউনস্ট্রিম পরীক্ষায় প্রভাব আসলে নগণ্য.

3. ট্রিজল দূষণ
Trizol এর প্রধান উপাদান হল ফেনল।ফেনলের প্রধান কাজ হল কোষকে লাইজ করা এবং কোষে প্রোটিন এবং নিউক্লিক অ্যাসিড পদার্থ মুক্ত করা।যদিও ফেনল কার্যকরভাবে প্রোটিনগুলিকে বিকৃত করতে পারে, তবে এটি RNase কার্যকলাপকে সম্পূর্ণরূপে বাধা দিতে পারে না।তাই, 8-হাইড্রোক্সিকুইনোলিন, গুয়ানিডিন আইসোথিওসায়ানেট, β-মারকাপটোথেনল, ইত্যাদি TRIzol-এ যুক্ত করা হয় যাতে অন্তঃসত্ত্বা এবং বহির্মুখী RNase প্রতিরোধ করা হয়।
সেলুলার RNA নিষ্কাশন করার সময়, Trizol দ্রুত কোষগুলিকে লাইজ করতে পারে এবং কোষ থেকে নিঃসৃত নিউক্লিয়াসকে বাধা দিতে পারে এবং অবশিষ্ট Trizol উল্লেখযোগ্যভাবে A260/A230 অনুপাতকে কমিয়ে দেবে।
প্রক্রিয়াকরণ পদ্ধতি: সেন্ট্রিফিউজিং করার সময়, এটি অবশ্যই লক্ষ করা উচিত যে ট্রিজলের ফেনল 4° এবং ঘরের তাপমাত্রার অবস্থার অধীনে জলের পর্যায়ে সহজেই দ্রবণীয়।

4. ইথানলের অবশিষ্টাংশ
ডিএনএ-তে আবদ্ধ হতে পারে এমন লবণের আয়নগুলিকে দ্রবীভূত করার সময় ইথানল চূড়ান্ত প্রক্রিয়ায় ডিএনএকে প্ররোচিত করতে ব্যবহৃত হয়।শোষণের তরঙ্গদৈর্ঘ্য সর্বোচ্চএর শোষণ শিখরইথানল 230-240 এনএম, যাA260/A230 এর অনুপাতও কমিয়ে দেবে.
ইথানলের অবশিষ্টাংশ এড়ানোর পদ্ধতিটি চূড়ান্ত নির্গমনের সময় দুবার পুনরাবৃত্তি করা যেতে পারে,অগ্নিগোলকদুই মিনিটের জন্য ইথানলকে সম্পূর্ণরূপে বাষ্পীভূত করার অনুমতি দেওয়ার জন্য বাফার যোগ করার আগে।
যাইহোক, এটা জানা উচিত যে অনুপাত শুধুমাত্র RNA মানের একটি মূল্যায়ন সূচক।যদি উপরে উল্লিখিত ক্রিয়াকলাপগুলি কঠোরভাবে নিয়ন্ত্রিত হয় তবে অনুপাত এবং মান পরিসরের মধ্যে বিচ্যুতি ডাউনস্ট্রিম পরীক্ষাগুলিতে খুব বেশি প্রভাব ফেলবে না।
সংশ্লিষ্ট পণ্য:
পশু মোট RNA বিচ্ছিন্নতা কিট
উদ্ভিদ মোট RNA বিচ্ছিন্নতা কিট
সেল টোটাল আরএনএ আইসোলেশন কিট
প্ল্যান্ট টোটাল আরএনএ আইসোলেশন কিট প্লাস