কতটুকু জানেন

সম্পর্কে এনইউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন

বিশুদ্ধ নিউক্লিক অ্যাসিডের শুরু এবং শেষ

শুরুতে সবকিছুই কঠিন, বিশুদ্ধ নিউক্লিক অ্যাসিড সবচেয়ে বেশি

আণবিক পরীক্ষার সূচনা, পরবর্তী পরীক্ষার জন্য

সাফল্য বা ব্যর্থতার একটি গুরুত্বপূর্ণ প্রভাব রয়েছে।

ট্রেস/আল্ট্রা-ট্রেস ইউভি স্পেকট্রোফোটোমিটার অনেক বৈজ্ঞানিক গবেষকদের পছন্দের কারণ এটি নিউক্লিক অ্যাসিড ঘনত্ব এবং প্রোটিন এবং লবণ আয়নের অবশিষ্টাংশ সহজভাবে, দ্রুত এবং অর্থনৈতিকভাবে সনাক্ত করতে পারে।

আমরা সবাই জানি, A260 মানে নিউক্লিক অ্যাসিড শোষণ OD মান, A280 মানে প্রোটিন ঘনত্ব শোষণ OD মান, A230 মানে লবণ আয়ন ঘনত্ব শোষণ OD মান, তাই A260 নিউক্লিক অ্যাসিড ঘনত্বকে রূপান্তর করতে পারে, A260/280 মানে প্রোটিনের অবশিষ্টাংশ, A260/260 ভিত্তিক গবেষণার মাধ্যমে এই বিধি-ব্যবস্থা আবিষ্কার করা হয়, কিন্তু এই 260/260 ভিত্তিক লবণ। পরিমাপের ফলাফলের একটি বড় সংখ্যার উপর, এবং এটি "প্রচলিতবিশ্বাস করা যে এটি ডিএনএ এবং আরএনএর বিশুদ্ধতা ব্যাখ্যা করতে পারেএকটি নির্দিষ্ট পরিমাণ.এটি নিউক্লিক অ্যাসিডের ফলন এবং বিশুদ্ধতা সনাক্তকরণের একমাত্র মান নয়, এটি শুধুমাত্র একটি রেফারেন্স হিসাবে ব্যবহৃত হয় এবং এটি একটি "সোনার মান" নয়।

Thermo Fisher ND-2000 ম্যানুয়াল পরীক্ষার ফলাফলের নির্ভরযোগ্যতার উপর জোর দেয়

কারণ হল যে একটি মাইক্রো/আল্ট্রামাইক্রো ইউভি স্পেকট্রোফোটোমিটার ব্যবহার করে প্রাপ্ত ফলাফলগুলি কেবলমাত্র পাশ থেকে নিউক্লিক অ্যাসিডের ফলন এবং বিশুদ্ধতা প্রতিফলিত করে এবং অনেকগুলি প্রভাবক কারণ রয়েছে (অপটিক্যাল পাথ, নমুনার আয়তন, নমুনার ঘনত্ব, pH মান, অন্যান্য আয়ন যা শোষণ পরিমাপকে প্রভাবিত করে, ইত্যাদি), OD মান প্রয়োজনীয়ভাবে পরিমাপ করা হয় না।একই সময়ে, শোষণের মান নির্ণয়কারী উপাদানের নির্দিষ্টতার অভাবের কারণে, একক-স্ট্রান্ডেড ডিএনএ, ডবল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএ, RNA, dNTPs এবং কিছু প্রোটিনের শোষণের শিখর 260nm তরঙ্গদৈর্ঘ্যে রয়েছে এবং একা A260 দ্বারা নির্ধারিত ঘনত্ব অবশ্যই DNA বা আসল RNA নয়।একাগ্রতা, এবং এর অখণ্ডতা এবং অবক্ষয় বিচার করা যায় না।

তাহলে আমাদের বিশুদ্ধ নিউক্লিক অ্যাসিডের গুণমান কীভাবে বিচার করবেন?সনাক্তকরণের জন্য একটি মাইক্রো/আল্ট্রামাইক্রো ইউভি স্পেকট্রোফোটোমিটার ব্যবহার করার পাশাপাশি, নিউক্লিক অ্যাসিডের বিশুদ্ধতা এবং অখণ্ডতা দৃশ্যমানভাবে প্রদর্শন করতে এবং একটি নির্দিষ্ট পরিমাণে ঘনত্ব নির্দেশ করার জন্য অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরসিসের মতো পদ্ধতিরও প্রয়োজন হয়।এইভাবে, বিভিন্ন পদ্ধতির সনাক্তকরণের ফলাফল থেকে প্রাপ্ত নিউক্লিক অ্যাসিডের ফলন এবং বিশুদ্ধতা বিশ্বাসযোগ্য।

পরীক্ষামূলক চার্ট তুলনা

H1299 কোষের জিনোমিক ডিএনএ কোম্পানি A-এর DNA নিষ্কাশন কিট ব্যবহার করে বের করা হয়েছিল এবং উল্লেখযোগ্য অপরিচ্ছন্নতা দূষণ দেখা গিয়েছিল, যার ফলে উচ্চ OD মান দেখা যায়

(OD পরিমাপ মান এবং সংশ্লিষ্ট ইলেক্ট্রোফেরোগ্রাম)

মূল্যায়ন সূচক

নিউক্লিক অ্যাসিড ফলন এবং গুণমান পরীক্ষার জন্য একটি "সোনার মান" আছে কি?

আমরা যতদূর জানি, কোন সহজ, দ্রুত এবং সস্তা পদ্ধতি নেই।স্পেকট্রোফটোমিটার, জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস বা ভর স্পেকট্রোমেট্রিই হোক না কেন, এগুলি সবই বিভিন্ন দিক থেকে দ্রবণে নিউক্লিক অ্যাসিডের ঘনত্ব এবং বিশুদ্ধতা প্রতিফলিত করে এবং একে অপরকে উল্লেখ করে বিচার করা প্রয়োজন।

সর্বোত্তম মূল্যায়ন সূচক সবসময়ফলো-আপ পরীক্ষামূলক অ্যাপ্লিকেশন.এটি বিপরীত প্রতিলিপি এবং পিসিআর পরিবর্ধনের দক্ষতাকে প্রভাবিত করে না।নির্ভরযোগ্য পরিবর্ধন পণ্য এবং Ct মান প্রাপ্ত করা, এবং সিকোয়েন্সিং দ্বারা একটি সম্পূর্ণ ক্রম প্রাপ্ত করা সফল নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন।

সংক্ষেপে, অনুপাত-শুধু তত্ত্বের দৃষ্টিভঙ্গিকে "ভালো নিষ্কাশন পরামিতি হিসাবে ভাল ডাউনস্ট্রিম পরীক্ষামূলক ফলাফল ব্যবহার করে" দৃষ্টিভঙ্গি দ্বারা চ্যালেঞ্জ করা উচিত!

উচ্চ ডিএনএ/আরএনএ বিশুদ্ধতা পেতে প্রস্তাবিত ফোরজিন ডিএনএ আরএনএ নিষ্কাশন কিট:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/