পরীক্ষামূলক কর্মীদের আচরণকে মানসম্মত করতে PCR পরীক্ষামূলক SOP প্রতিষ্ঠা করুন।
পরীক্ষক কঠোরভাবে অপারেটিং পদ্ধতিগুলি মেনে চলে, এবং পিসিআর দূষণ কমিয়ে দেয় যা মানুষের কারণের কারণে হতে পারে বা দূষণের ঘটনাকে প্রতিরোধ করে।এছাড়াও, পরীক্ষকের সংশ্লিষ্ট পেশাদার জ্ঞান এবং দক্ষতা থাকা উচিত, যার মধ্যে রয়েছে সংশ্লিষ্ট যন্ত্রপাতি পরিচালনায় দক্ষতা, পুরো কাজের প্রক্রিয়াটি স্পষ্ট করা, দূষণের চিকিত্সা পদ্ধতি এবং পরীক্ষাগারের মান নিয়ন্ত্রণের পদ্ধতিগুলি আয়ত্ত করা এবং পরীক্ষার ফলাফলগুলি সঠিকভাবে ব্যাখ্যা করতে সক্ষম হওয়া।
একটি আদর্শ পিসিআর পরীক্ষাগার স্থাপন করা।
পিসিআর পরীক্ষাগার নীতিগতভাবে চারটি ক্ষেত্রে বিভক্ত, যথা বিকারক প্রস্তুত এলাকা, নমুনা প্রক্রিয়াকরণ এলাকা, পরিবর্ধন এলাকা এবং প্রশস্তকরণ পণ্য বিশ্লেষণ এলাকা।প্রথম দুটি এলাকা হল প্রাক-বিবর্ধন এলাকা, এবং শেষ দুটি ক্ষেত্র হল পোস্ট-এম্প্লিফিকেশন এলাকা।প্রি-এম্প্লিফিকেশন জোন এবং পোস্ট-এম্প্লিফিকেশন জোন কঠোরভাবে আলাদা করা উচিত।পরীক্ষামূলক উপকরণ, রিএজেন্ট, রেকর্ডিং কাগজ, কলম, পরিষ্কারের উপকরণ ইত্যাদি, শুধুমাত্র প্রি-এম্প্লিফিকেশন এলাকা থেকে পোস্ট-এম্প্লিফিকেশন এলাকায় প্রবাহিত হতে পারে, অর্থাৎ রিএজেন্ট প্রস্তুতি এলাকা → নমুনা প্রক্রিয়াকরণ এলাকা → পরিবর্ধন এলাকা → পরিবর্ধন পণ্য বিশ্লেষণ এলাকা থেকে প্রবাহিত হতে পারে এবং পেছনের দিকে প্রবাহিত হওয়া উচিত নয়।পরীক্ষাগারে বায়ুপ্রবাহও প্রি-এম্প্লিফিকেশন এলাকা থেকে পোস্ট-এম্প্লিফিকেশন এলাকায় প্রবাহিত হওয়া উচিত এবং পিছনে প্রবাহিত হওয়া উচিত নয়।আদর্শ পিসিআর পরীক্ষাগার নকশা নীচে দেখানো হয়েছে:
চিত্র A: বাফার রুমে নেতিবাচক চাপ সহ আদর্শ PCR পরীক্ষাগার সেটআপ মোড
চিত্র B: বাফার রুমে ইতিবাচক চাপ সহ আদর্শ PCR পরীক্ষাগার সেটআপ মোড
চিত্র A এবং চিত্র B তে দেওয়া PCR ল্যাবরেটরি সেটআপ ডায়াগ্রামগুলি আরও আদর্শ সেটআপ মোড হওয়া উচিত এবং শর্তযুক্ত পরীক্ষাগার ডিজাইনের জন্য এই মোডটি উল্লেখ করতে পারে।সাধারণ পরীক্ষাগারগুলির জন্য, এটি সুপারিশ করা হয় যে পিসিআর প্রশস্তকরণ এলাকা এবং পণ্য বিশ্লেষণ এলাকা আলাদা করা যেতে পারে, এবং কভার খোলার নমুনা প্রস্তুত এলাকা এবং পিসিআর পরিবর্ধন এলাকায় যতটা সম্ভব হ্রাস করা উচিত।মনে রাখবেন: পণ্য বিশ্লেষণের এলাকায় পণ্য এবং পরীক্ষামূলক সরবরাহগুলি নমুনা তৈরির এলাকা এবং পিসিআর প্রশস্তকরণ এলাকায় নেওয়া থেকে কঠোরভাবে নিষিদ্ধ।
যদি পরীক্ষাগার শুধুমাত্র পিসিআর সনাক্তকরণ এবং সনাক্তকরণ সঞ্চালন করে, তবে প্রচলিত পিসিআরের পরিবর্তে ফ্লুরোসেন্ট পরিমাণগত পিসিআর ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়।
ফ্লুরোসেন্স পরিমাণগত পিসিআর সনাক্তকরণের ফলাফলগুলি ফ্লুরোসেন্স সংকেত দ্বারা সংগ্রহ এবং বিশ্লেষণ করা যেতে পারে, তাই প্রতিক্রিয়ার পরে ইলেক্ট্রোফোরসিসের জন্য ঢাকনা খোলার প্রয়োজন নেই, যা অ্যারোসল গঠনের জন্য প্রতিক্রিয়া পণ্যগুলির ফুটো থেকে সৃষ্ট পিসিআর পণ্যের দূষণ এড়ায়।জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস লোড করার সময় আপনি যদি ক্যাপ খোলার সংখ্যা বাড়ান, তাহলে অ্যারোসল দূষণ ঘটতে পারে।এটি পরিমাণগত পিসিআর প্রয়োগের প্রচার এবং ধীরে ধীরে গুণগত পিসিআর প্রতিস্থাপন করার সুপারিশ করা হয়।
পিসিআর প্রতিক্রিয়ার জন্য UNG-বিরোধী PCR পণ্য দূষণ ব্যবস্থা ব্যবহার করা হয়।
সিস্টেমটি dTTP এর পরিবর্তে dUTP ব্যবহার করে।পিসিআর প্রতিক্রিয়ার পরে, সমস্ত পিসিআর পণ্য (ডিএনএ টুকরা) dUTP-এর সাথে একত্রিত হয়;পিসিআর প্রতিক্রিয়ার পরবর্তী রাউন্ডে, সিস্টেমে যুক্ত ইউএনজি এনজাইমটি পিসিআর-এর আগে 5 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে ইনকিউবেট করা হয়, যা বিশেষভাবে ডিইউটিপি ধারণকারী সমস্ত ডিএনএ খণ্ডকে হ্রাস করতে পারে এবং তারপরে পিসিআর প্রতিক্রিয়া সম্পাদন করতে পারে।এটি পিসিআর পণ্য দ্বারা সৃষ্ট অ্যারোসল দূষণকে সম্পূর্ণরূপে অপসারণ করতে পারে।প্রভাব নীচের চিত্রে দেখানো হয়েছে:
দ্রষ্টব্য: সরাসরি পিসিআর সিরিজের জন্য, আপনি ফোরজিনের অ্যান্টি-পিসিআর পণ্য দূষণ সিস্টেমের সিরিজ পণ্যগুলি বেছে নিতে পারেনসাজেস্ট করুন
যে সমস্ত পরীক্ষাগারগুলি বড় আকারের জিনোটাইপিং পরীক্ষা পরিচালনা করে, তাদের জন্য যুক্তিসঙ্গত পরীক্ষাগার নির্মাণের পাশাপাশি বিকারক পরীক্ষা করার জন্য ইউএনজি-এর অ্যান্টি-পিসিআর পণ্য দূষণ ব্যবস্থা ব্যবহার করার জন্য দৃঢ়ভাবে সুপারিশ করা হয়।
অনুস্মারক: এই সিস্টেমের ব্যবহার পিসিআর পণ্যের দূষণ দূর করতে পারে না যা ইতিমধ্যে সৃষ্ট হয়েছে।তাই, প্রাসঙ্গিক পরীক্ষার শুরুতে UNG সিস্টেম ব্যবহার করা উচিত, এবং PCR প্রশস্তকরণের জন্য UNG সিস্টেম ব্যবহার করা উচিত, যাতে PCR পণ্যের দূষণ রোধ করা যায় ফলস পজিটিভ।
বড় আকারের পরীক্ষা পরিচালনা করার সময় ফোরেজিনের ডাইরেক্ট পিসিআর-ইউএনজি সিস্টেম ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়, যেমন:
গাছের পাতার ডাইরেক্ট পিসিআর কিট-ইউএনজি;
গাছের বীজ সরাসরি পিসিআর কিট-ইউএনজি;
প্রাণীর টিস্যু ডাইরেক্ট পিসিআর কিট-ইউএনজি;
মাউস টেইল ডাইরেক্ট পিসিআর কিট-ইউএনজি;
জেব্রা ফিশ ডাইরেক্ট পিসিআর কিট-ইউএনজি।
Foregene থেকে কিট এই সিরিজশুধুমাত্র দ্রুত এবং বৃহৎ পরিসরে PCR সনাক্তকরণ সঞ্চালন করতে পারে না, কিন্তু কার্যকরভাবে PCR পণ্য দূষণ প্রতিরোধ ও নিয়ন্ত্রণ করতে পারে।
পোস্ট সময়: মার্চ-19-2021
