30 বছর আগে পিসিআর প্রযুক্তি উদ্ভাবনের পর থেকে, গবেষকরা নিউক্লিক অ্যাসিডের পৃথকীকরণ এবং নিষ্কাশন নিয়ে সমস্যায় পড়েছেন।টিস্যু নমুনা ব্যবহার করে সরাসরি পিসিআর প্রতিক্রিয়া সম্পাদন করা অনেক গবেষকের স্বপ্ন।কিন্তু ৩০ বছরেও এই স্বপ্ন পূরণ হয়নি।কারণটি হল যে বিচ্ছিন্ন টিস্যু প্রচুর পরিমাণে প্রতিরোধক উপাদান নিঃসরণ করবে।

এই প্রতিষেধক উপাদানগুলি পিসিআর প্রতিক্রিয়াতে একটি শক্তিশালী প্রতিরোধমূলক প্রভাব ফেলবে, কিছু প্রাইমার এবং টেমপ্লেটকে আবদ্ধ করতে অক্ষম করবে, কিছুতে শক্তিশালী প্রোটিন ডিনাচুরেশন ফাংশন রয়েছে, যার ফলে নিউক্লিক অ্যাসিড পলিমারেজ নিষ্ক্রিয় হয়ে যায় এবং কিছু সরাসরি প্রাইমার এবং টেমপ্লেটকে বাঁধতে বাধা দেয়।এই সমস্ত কারণগুলির কারণে পিসিআর প্রতিক্রিয়া মসৃণভাবে চলতে পারে না।