পিসিআর প্রতিক্রিয়ার অসামান্য বৈশিষ্ট্য হল এর বৃহৎ পরিবর্ধন ক্ষমতা এবং অত্যন্ত উচ্চ সংবেদনশীলতা।PCR কর্মক্ষমতা এবং সনাক্তকরণ দক্ষতা উন্নত করার জন্য, আমরা PCR পরিবর্ধন ক্ষমতা এবং সনাক্তকরণ সংবেদনশীলতা উন্নত করতে প্রতিশ্রুতিবদ্ধ, কিন্তু মাথাব্যথা পরীক্ষার প্রক্রিয়ার মধ্যে রয়েছে।মিথ্যা ইতিবাচক প্রায়ই ঘটে, এবং খুব অল্প পরিমাণ নমুনা ক্রস-দূষণ বা PCR পণ্য দূষণ পরীক্ষায় মিথ্যা ইতিবাচক কারণ হতে পারে।
পাঁচ ধরনের পিসিআর পণ্য দূষণ
পিসিআর দূষণের অনেক কারণ রয়েছে, যাকে মোটামুটিভাবে নিম্নলিখিত বিভাগে ভাগ করা যেতে পারে:
নমুনা দূষণ প্রধানত নমুনা সংগ্রহের জন্য কন্টেইনারের দূষণের কারণে হয়, অথবা নমুনাটি স্থাপন করা হলে, এটি ঢিলেঢালা সীলমোহরের কারণে পাত্র থেকে বেরিয়ে যায়, বা নমুনাটি পাত্রের বাইরের অংশে লেগে থাকে, যা ক্রস-দূষণ ঘটায়;দূষণ নমুনার মধ্যে দূষণ বাড়ে;কিছু জীবাণুর নমুনা, বিশেষ করে ভাইরাস, অ্যারোসলের সাথে ছড়িয়ে পড়তে পারে বা অ্যারোসল তৈরি করতে পারে, যার ফলে পারস্পরিক দূষণ হয়।
এর প্রধান কারণ হল পিসিআর রিএজেন্ট তৈরির সময় নমুনা বন্দুক, পাত্র, ডাবল ডিস্টিল্ড ওয়াটার এবং অন্যান্য দ্রবণগুলি পিসিআর নিউক্লিক অ্যাসিড টেমপ্লেট দ্বারা দূষিত হয়।
আণবিক জীববিজ্ঞান পরীক্ষাগার এবং কিছু পরীক্ষাগারে যেগুলি ক্লোন প্লাজমিডগুলিকে ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহার করে, ক্লোন প্লাজমিড দূষণের সমস্যাও সাধারণ।কারণ একক আয়তনে প্লাজমিড ক্লোনিং এর বিষয়বস্তু বেশ বেশি, এবং পরিশোধন প্রক্রিয়ায় আরও বেশি সরঞ্জাম এবং বিকারক প্রয়োজন, এবং জীবিত কোষগুলির শক্তিশালী বৃদ্ধি এবং প্রজনন ক্ষমতার কারণে জীবিত কোষে প্লাজমিড দূষিত হওয়ার সম্ভাবনা খুব বেশি।
পরিবর্ধিত পণ্যের দূষণ পিসিআর প্রতিক্রিয়াগুলির মধ্যে সবচেয়ে সাধারণ দূষণ সমস্যা।যেহেতু পিসিআর পণ্যের অনুলিপির পরিমাণ বড় (সাধারণত 1013 কপি/মিলি), যা পিসিআর সনাক্তকরণ অনুলিপি সংখ্যার সীমার চেয়ে অনেক বেশি, খুব অল্প পরিমাণে পিসিআর পণ্য দূষণ মিথ্যা ইতিবাচক কারণ হতে পারে।
এরোসল দূষণ হল পিসিআর পণ্যগুলির দূষণের সবচেয়ে সম্ভাব্য রূপ, এবং এটি উপেক্ষা করাও সবচেয়ে সহজ।এটি তরল পৃষ্ঠ এবং বাতাসের মধ্যে ঘর্ষণ দ্বারা গঠিত হয়।সাধারণত, যখন ঢাকনা খোলা হয়, যখন নমুনাটি উচ্চাকাঙ্খিত হয়, বা এমনকি যখন প্রতিক্রিয়া টিউব জোরে নাড়া হয় তখন অ্যারোসল দূষণ তৈরি হতে পারে।গণনা অনুসারে, একটি অ্যারোসোল কণা 48,000 কপি ধারণ করতে পারে, তাই এটি দ্বারা সৃষ্ট দূষণ একটি সমস্যা যা বিশেষ মনোযোগের দাবি রাখে।
বিশেষ করে, পরীক্ষাগারগুলি প্রায়ই একটি নির্দিষ্ট জিন পরীক্ষা করার জন্য একই জোড়া প্রাইমার ব্যবহার করে।সময়ের সাথে সাথে, পরীক্ষাগারের জায়গায় প্রচুর পরিমাণে পিসিআর পণ্য দূষণ ঘটবে।একবার এই ধরনের দূষণ ঘটলে, অল্প সময়ের মধ্যে তা নির্মূল করা কঠিন।
প্রথম তিন ধরনের দূষণের জন্য, আমরা এড়াতে কার্যকর উপায় ব্যবহার করতে পারি, কিন্তু পিসিআর পণ্য দ্বারা সৃষ্ট দূষণ প্রতিরোধ করা কঠিন, বিশেষ করে অ-মানক পিসিআর পরীক্ষাগার নির্মাণে।পিসিআর প্রক্রিয়ায়, যখন পাইপেটের ডগা চুষে ফেলে এবং তরল ফুঁকে দেয়, এবং পিসিআর টিউব কভারটি খোলা হয়, তখন একটি অ্যারোসল তৈরি হবে।অ্যারোসল দ্বারা বাহিত ডিএনএ অণুগুলি (একটি অ্যারোসল হাজার হাজার ডিএনএ বহন করতে পারে) নির্মূল করা কঠিন কারণ তারা বাতাসে ভাসছে।একবার পিসিআর পরীক্ষার পরবর্তী রাউন্ড চালু হলে, মিথ্যা ইতিবাচক অনিবার্যভাবে ঘটবে।
নীচের চিত্রে দেখানো হিসাবে, নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ আগ্রহের সংশ্লিষ্ট ব্যান্ডকেও প্রশস্ত করেছে:
পিসিআর দূষণ এবং প্রতিরোধের এই ইস্যুটির প্রথম অংশ এখানে উপস্থাপন করা হয়েছে।পরবর্তী সংখ্যা আপনার জন্য দ্বিতীয় অংশ "পিসিআর পণ্য দূষণ প্রতিরোধ" নিয়ে আসবে, তাই সাথে থাকুন!
পোস্ট সময়: Jul-25-2017
