ভাইরাল ডিএনএ এবং আরএনএ আইসোলেশন কিট ভাইরাল ডিএনএ এবং আরএনএ নিষ্কাশন পরিশোধন প্রস্তুতি কিট
স্পেসিফিকেশন
50 প্রস্তুতি, 200 প্রস্তুতি
ভাইরাল RNA নিউক্লিক অ্যাসিড পিউরিফিকেশন এক্সট্রাকশন আইসোলেশন কিট ফোরজিন দ্বারা তৈরি স্পিন কলাম এবং সূত্র ব্যবহার করে, যা প্লাজমা, সিরাম, সেল-ফ্রি বডি ফ্লুইড এবং সেল কালচার সুপারনাট্যান্টের মতো নমুনাগুলি থেকে দক্ষতার সাথে উচ্চ-বিশুদ্ধতা এবং উচ্চ-মানের ভাইরাল RNA বের করতে পারে।কিটটি বিশেষভাবে লিনিয়ার অ্যাক্রিলামাইড যোগ করে, যা সহজেই নমুনা থেকে অল্প পরিমাণে আরএনএ ক্যাপচার করতে পারে।RNA-শুধু কলাম দক্ষতার সাথে RNA আবদ্ধ করতে পারে।কিট একই সময়ে বিপুল সংখ্যক নমুনা প্রক্রিয়া করতে পারে।
পুরো কিটে আরএনএজ নেই, তাই বিশুদ্ধ আরএনএ ক্ষয় হবে না।বাফার viRW1 এবং Buffer viRW2 নিশ্চিত করতে পারে যে প্রাপ্ত ভাইরাল নিউক্লিক অ্যাসিড প্রোটিন, নিউক্লিয়াস বা অন্যান্য অমেধ্য মুক্ত, যা সরাসরি ডাউনস্ট্রিম আণবিক জীববিজ্ঞান পরীক্ষার জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে।
কিট উপাদান
লিনিয়ার অ্যাক্রিলামাইড |
বাফার ডিআরএল |
বাফার RW1, বাফার RW2 |
RNase-মুক্ত ddH2O |
DNA/RNA কলাম |
নির্দেশনা |
বৈশিষ্ট্য ও সুবিধা
■ সম্পূর্ণ প্রক্রিয়া জুড়ে কক্ষ তাপমাত্রায় (15-25℃) অপারেশন, বরফ স্নান এবং নিম্ন তাপমাত্রা সেন্ট্রিফিউগেশন ছাড়া।
■ সম্পূর্ণ কিট RNase-মুক্ত, আরএনএ অবক্ষয় নিয়ে চিন্তা করার দরকার নেই।
■ উচ্চ নিউক্লিক অ্যাসিড ফলন: DNA/RNA-শুধু কলাম এবং অনন্য সূত্র দক্ষতার সাথে DNA এবং RNA শুদ্ধ করতে পারে।
■ বড় নমুনা প্রক্রিয়াকরণ ক্ষমতা: প্রতিবার 200μl পর্যন্ত নমুনা প্রক্রিয়া করা যেতে পারে।
■ দ্রুত গতি: পরিচালনা করা সহজ এবং 20 মিনিটের মধ্যে সম্পন্ন করা যেতে পারে।
■ নিরাপত্তা: কোন জৈব বিকারক প্রয়োজন নেই.
■ উচ্চ গুণমান: বিশুদ্ধ RNA টুকরা উচ্চ বিশুদ্ধতা, প্রোটিন এবং অন্যান্য অমেধ্য মুক্ত, এবং বিভিন্ন ডাউনস্ট্রিম পরীক্ষামূলক অ্যাপ্লিকেশন পূরণ করতে পারে।
কিট অ্যাপ্লিকেশন
এটি প্লাজমা, সিরাম, সেল-ফ্রি বডি ফ্লুইড এবং সেল কালচার সুপারনাট্যান্টের মতো নমুনায় ভাইরাল নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং পরিশোধনের জন্য উপযুক্ত।
কর্মধারা
ডায়াগ্রাম
স্টোরেজ এবং শেলফ লাইফ
■ এই কিটটি 24 মাসের জন্য শুষ্ক অবস্থায় ঘরের তাপমাত্রায় (15-25℃) সংরক্ষণ করা যেতে পারে;যদি এটি দীর্ঘ সময়ের জন্য সংরক্ষণ করার প্রয়োজন হয় তবে এটি 2-8℃ এ সংরক্ষণ করা যেতে পারে।
■ লিনিয়ার অ্যাক্রিলামাইড দ্রবণ ঘরের তাপমাত্রায় 7 দিনের জন্য সংরক্ষণ করা যেতে পারে;কিটটি পাওয়ার পরে, অনুগ্রহ করে এটি বের করুন এবং -20 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করুন।
■ বাফার ডিআরএল-এ লিনিয়ার অ্যাক্রিলামাইড যোগ করার পরে, এটি 48 ঘন্টা পর্যন্ত 2-8 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করা যেতে পারে।রেডিমেড সমাধান ব্যবহার করুন.
সমস্যা বিশ্লেষণ গাইড
ভাইরাল ডিএনএ/আরএনএ নিষ্কাশনে যে সমস্যার সম্মুখীন হতে পারে তার একটি বিশ্লেষণ নিচে দেওয়া হল, আশা করছি আপনার পরীক্ষায় সহায়ক হবে।উপরন্তু, অপারেশন নির্দেশাবলী এবং সমস্যা বিশ্লেষণ ব্যতীত অন্যান্য পরীক্ষামূলক বা প্রযুক্তিগত সমস্যার জন্য, আমরা আপনাকে সাহায্য করার জন্য প্রযুক্তিগত সহায়তা নিবেদিত করেছি।আপনার যদি কোন প্রয়োজন থাকে, অনুগ্রহ করে আমাদের সাথে যোগাযোগ করুন: 028-83360257 বা ই-মেইল:
Tech@foregene.com.
কোন নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন বা কম নিউক্লিক অ্যাসিড ফলন
সাধারণত অনেকগুলি কারণ রয়েছে যা পুনরুদ্ধারের দক্ষতাকে প্রভাবিত করে, যেমন: নমুনা নিউক্লিক অ্যাসিড সামগ্রী, অপারেশন পদ্ধতি, ইলুশন ভলিউম ইত্যাদি।
সাধারণ কারণ বিশ্লেষণ:
1. প্রক্রিয়া চলাকালীন একটি বরফ স্নান বা নিম্ন তাপমাত্রা (4°C) সেন্ট্রিফিউগেশন করা হয়েছিল।
পরামর্শ: পুরো প্রক্রিয়া জুড়ে ঘরের তাপমাত্রায় (15-25 ডিগ্রি সেলসিয়াস) কাজ করুন, বরফ স্নান করবেন না এবং কম তাপমাত্রার সেন্ট্রিফিউগেশন করবেন না।
2. নমুনাটি ভুলভাবে সংরক্ষণ করা হয়েছিল বা নমুনাটি খুব দীর্ঘ সময়ের জন্য সংরক্ষণ করা হয়েছিল৷
সুপারিশ: নমুনাগুলি -80 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করুন এবং বারবার জমাট বাঁধা এবং গলানো এড়ান;নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশনের জন্য সদ্য সংগ্রহ করা নমুনাগুলি ব্যবহার করার চেষ্টা করুন।
3. অপর্যাপ্ত নমুনা lysis.
সুপারিশ: অনুগ্রহ করে নিশ্চিত করুন যে নমুনা এবং লাইসিস কার্যকরী দ্রবণটি পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রিত হয়েছে এবং ঘরের তাপমাত্রায় (15-25 ডিগ্রি সেলসিয়াস) 10 মিনিটের জন্য ইনকিউব করা হয়েছে।
4. eluent এর ভুল সংযোজন।
পরামর্শ: নিশ্চিত করুন যে RNase-Free ddH2O পিউরিফিকেশন কলামের ঝিল্লির মাঝখানে ড্রপওয়াইজে যোগ করা হয়েছে এবং এটি পরিশোধন কলামের রিংয়ে ফেলবেন না।
5. পরম ইথানলের সঠিক আয়তন বাফার RW2 এ যোগ করা হয়নি।
পরামর্শ: অনুগ্রহ করে নির্দেশাবলী অনুসরণ করুন, বাফার RW2 এ পরম ইথানলের সঠিক ভলিউম যোগ করুন এবং কিট ব্যবহার করার আগে ভালভাবে মিশ্রিত করুন।
6. অনুপযুক্ত নমুনা ভলিউম।
পরামর্শ: প্রতি 500µl বাফার DRL এর জন্য 200µl নমুনা প্রক্রিয়া করা হয়।অত্যধিক নমুনা প্রক্রিয়াকরণের ফলে নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন ফলন কম হবে।
7. অনুপযুক্ত ইলিউশন ভলিউম বা অসম্পূর্ণ ইলিউশন।
সুপারিশ: পরিশোধন কলামের ইলুয়েন্ট ভলিউম 30-50μl;ইলুশন প্রভাব সন্তোষজনক না হলে, প্রিহিটেড RNase-ফ্রি ddH2O যোগ করার পর ঘরের তাপমাত্রায় সময় বাড়ানোর পরামর্শ দেওয়া হয়, যেমন 5-10 মিনিট।
8. বাফার RW2 দিয়ে ধোয়ার পর কলামে ইথানল থাকে।
পরামর্শ: যদি ইথানল বাফার RW2 এর সাথে সেন্ট্রিফিউগেশনের পরে 2 মিনিটের জন্য থেকে যায়, তবে অবশিষ্ট ইথানল সম্পূর্ণরূপে অপসারণের জন্য কলামটি সেন্ট্রিফিউগেশনের পরে 5 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় স্থাপন করা যেতে পারে।
বিশুদ্ধ নিউক্লিক অ্যাসিড ক্ষয়প্রাপ্ত হয়
বিশুদ্ধ নিউক্লিক অ্যাসিডের গুণমান নমুনা সংরক্ষণ, RNase দূষণ, অপারেশন এবং অন্যান্য কারণগুলির সাথে সম্পর্কিত।সাধারণ কারণ বিশ্লেষণ:
1. সংগৃহীত নমুনা সময়মতো সংরক্ষণ করা হয়নি।
পরামর্শ: সংগ্রহের পরে যদি নমুনাটি সময়মতো ব্যবহার না করা হয়, অনুগ্রহ করে তা অবিলম্বে কম তাপমাত্রায় -80 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করুন।RNA নিষ্কাশনের জন্য, সদ্য সংগ্রহ করা নমুনা ব্যবহার করার চেষ্টা করুন।
2. নমুনা সংগ্রহ করুন এবং বারবার হিমায়িত করুন এবং গলা দিন।
পরামর্শ: নমুনা সংগ্রহ এবং সঞ্চয় করার সময় হিমায়িত এবং গলানো (একের বেশি নয়) এড়িয়ে চলুন, অন্যথায় নিউক্লিক অ্যাসিডের ফলন হ্রাস পাবে।
3. অপারেশন রুমে RNase চালু করা হয় বা ডিসপোজেবল গ্লাভস, মাস্ক ইত্যাদি পরা হয় না।
সুপারিশ: RNA নিষ্কাশন পরীক্ষাগুলি একটি পৃথক RNA অপারেশন রুমে সর্বোত্তমভাবে সঞ্চালিত হয়, এবং পরীক্ষাগারের টেবিলটি পরীক্ষার আগে পরিষ্কার করা উচিত।
পরীক্ষার সময় ডিসপোজেবল গ্লাভস এবং মুখোশ পরিধান করুন যাতে RNA এর অবক্ষয় সবচেয়ে বেশি পরিমাণে RNase প্রবর্তনের কারণে হয়।
4. বিকারকটি ব্যবহারের সময় RNase দ্বারা দূষিত হয়েছিল।
সুপারিশ: সম্পর্কিত পরীক্ষার জন্য একটি নতুন ভাইরাল ডিএনএ/আরএনএ আইসোলেশন কিট দিয়ে প্রতিস্থাপন করুন।
5. RNA ম্যানিপুলেশনের জন্য ব্যবহৃত সেন্ট্রিফিউজ টিউব এবং পাইপেট টিপস RNase দ্বারা দূষিত।
পরামর্শ: নিশ্চিত করুন যে RNA নিষ্কাশনের জন্য ব্যবহৃত সেন্ট্রিফিউজ টিউব, পাইপেট টিপস, পাইপেট ইত্যাদি সবই RNase-মুক্ত।
বিশুদ্ধ নিউক্লিক অ্যাসিড ডাউনস্ট্রিম পরীক্ষাগুলিকে প্রভাবিত করে
পরিশোধন কলাম দ্বারা বিশুদ্ধ ডিএনএ এবং আরএনএ, যদি লবণ আয়ন এবং প্রোটিনের পরিমাণ খুব বেশি হয়, তবে এটি নিম্নধারার পরীক্ষাগুলিকে প্রভাবিত করবে, যেমন: পিসিআর পরিবর্ধন, বিপরীত প্রতিলিপি ইত্যাদি।
1. বিলুপ্ত ডিএনএ এবং আরএনএ-তে অবশিষ্ট লবণ আয়ন থাকে।
পরামর্শ: নিশ্চিত করুন যে পরম ইথানলের সঠিক ভলিউম বাফার RW2-তে যোগ করা হয়েছে এবং অপারেটিং নির্দেশাবলীতে উল্লেখিত সেন্ট্রিফিউগেশন গতিতে বিশুদ্ধকরণ কলামটি দুবার ধুয়ে ফেলুন;লবণ আয়ন দূষণ কমাতে সেন্ট্রিফিউগেশন সঞ্চালন.
2. বিলুপ্ত ডিএনএ এবং আরএনএ-তে ইথানলের অবশিষ্টাংশ রয়েছে।
পরামর্শ: বাফার RW2 দিয়ে ওয়াশিং নিশ্চিত করার পরে, অপারেটিং নির্দেশাবলীতে সেন্ট্রিফিউগেশন গতিতে খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশন সঞ্চালন করুন;যদি এখনও ইথানলের অবশিষ্টাংশ থাকে তবে আপনি খালি টিউবটিকে সেন্ট্রিফিউজ করতে পারেন এবং তারপরে এটিকে 5 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় রাখতে পারেন যাতে ইথানলের অবশিষ্টাংশ সর্বাধিক পরিমাণে অপসারণ করা যায়।
নির্দেশিকা ম্যানুয়াল:
ভাইরাল ডিএনএ এবং আরএনএ আইসোলেশন কিট নির্দেশিকা ম্যানুয়াল