সীসা

লং নন-কোডিং RNA, lncRNA হল একটি নন-কোডিং RNA যার দৈর্ঘ্য 200 নিউক্লিওটাইডের বেশি, সাধারণত 200-100000 nt এর মধ্যে।lncRNA এপিজেনেটিক, ট্রান্সক্রিপশন এবং পোস্ট-ট্রান্সক্রিপশনাল স্তরে জিনের অভিব্যক্তি নিয়ন্ত্রণ করে এবং X ক্রোমোজোম সাইলেন্সিং, জিনোম ইমপ্রিন্টিং এবং ক্রোমাটিন পরিবর্তন, ট্রান্সক্রিপশন অ্যাক্টিভেশন, ট্রান্সক্রিপশন হস্তক্ষেপ, নিউক্লিয়ার ট্রান্সপোর্ট, কোষ চক্র নিয়ন্ত্রণ, কোষের পার্থক্য নিয়ন্ত্রণ এবং অন্যান্য জটিলতা নিয়ন্ত্রণ এবং অন্যান্য প্রভাব নিয়ন্ত্রণে অংশ নেয়। মানব রোগের সংঘটন, বিকাশ এবং প্রতিরোধের সাথে ঘনিষ্ঠভাবে জড়িত এবং বর্তমানে বায়োমেডিসিনের ক্ষেত্রে অন্যতম হট স্পট।

01  LncRNA এর প্রকার ও বৈশিষ্ট্য

lncRNA এর গঠনের বিভিন্ন উৎস অনুসারে অনেক প্রকারে বিভক্ত, যেমনটি উপরের চিত্রে দেখানো হয়েছে।নিম্নলিখিত বৈশিষ্ট্য আছে:

1. lncRNA গুলি সাধারণত দীর্ঘ হয়, গতিশীল অভিব্যক্তি এবং পার্থক্যের সময় বিভিন্ন স্প্লিসিং পদ্ধতি সহ
2. কোডিং জিনের সাথে তুলনা করে, lncRNA-এর সাধারণত নিম্ন অভিব্যক্তি স্তর থাকে
3. টিস্যু পার্থক্য এবং বিকাশের প্রক্রিয়ায় বেশিরভাগ lncRNA-এর সুস্পষ্ট অস্থায়ী এবং স্থানিক অভিব্যক্তি নির্দিষ্টতা রয়েছে
4. টিউমার এবং অন্যান্য রোগের চরিত্রগত অভিব্যক্তি আছে
5. lncRNA এর উপকোষীয় অবস্থানগুলি বৈচিত্র্যময়
6. ক্রম সংরক্ষণ কম, কিন্তু ফাংশন সংরক্ষণের একটি নির্দিষ্ট মাত্রা আছে, ইত্যাদি।

02 LncRNA রিভার্স ট্রান্সক্রিপশন সম্পর্কিত প্রায়শ জিজ্ঞাস্য প্রশ্নাবলী

কোষে lncRNA-এর কম বিষয়বস্তু, দীর্ঘ দৈর্ঘ্য এবং উচ্চ-স্তরের কাঠামোর কারণে, এই ধরনের RNA-তে প্রায়শই স্টেম লুপ বা হেয়ারপিনের মতো জটিল গঠন থাকে এবং RT-qPCR অসফল রিভার্স ট্রান্সক্রিপশন বা কম দক্ষতার সমস্যায় পড়ে।

03 LncRNA বিপরীত প্রতিলিপি সমাধান

কেন্দ্রীয় নিয়মে, আরএনএ ভাইরাস তাদের নিজস্ব রিভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেজ ব্যবহার করে ডিএনএকে টেমপ্লেট হিসেবে ব্যবহার করে সংশ্লেষিত করার প্রক্রিয়াটিকে রিভার্স ট্রান্সক্রিপশন বলে।ভিট্রোতে সিডিএনএ টেমপ্লেট সংশ্লেষিত করতে আরএনএ ভাইরাস রিভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেজ ব্যবহার করার প্রক্রিয়াটিকে বিপরীত প্রতিলিপি বলা হয়।রিভার্স ট্রান্সক্রিপশন সিস্টেমে অন্তর্ভুক্ত প্রধান উপাদান: RNA টেমপ্লেট, রিভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেস, প্রাইমার এবং অন্যান্য উপাদান।

1.RNA টেমপ্লেট

বিপরীত প্রতিলিপিতে RNA টেমপ্লেটের প্রভাব এর গঠন, বিশুদ্ধতা এবং অখণ্ডতায় প্রতিফলিত হয়।নিষ্কাশিত RNA-এর বিশুদ্ধতা এবং অখণ্ডতা যত বেশি হবে, বিপরীত প্রতিলিপির দক্ষতা তত বেশি হবে এবং পরবর্তী পরিমাণগত ফলাফল তত বেশি নির্ভুল হবে।সাধারণত ব্যবহৃত RNA নিষ্কাশন বিকারক দ্বারা বিশুদ্ধ করা RNA-এ প্রায়ই অ্যালকোহল এবং গুয়ানিডিন লবণের অবশিষ্টাংশ থাকে, যা বেশিরভাগ বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টেজের উপর একটি শক্তিশালী প্রতিরোধক প্রভাব ফেলে।

2. বিপরীত প্রতিলিপি

সম্পূর্ণ বিপরীত ট্রান্সক্রিপশন সিস্টেমে বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টেজের একটি মূল প্রভাব রয়েছে।বেশিরভাগ পরীক্ষাগারে ব্যবহৃত বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টের জন্য উপযুক্ত তাপমাত্রা সাধারণত 42°C হয়।প্রকৃতপক্ষে, উচ্চ-স্তরের আরএনএ কাঠামো খোলার জন্য উচ্চ তাপমাত্রার প্রয়োজন হয় এবং বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টেজের জন্য প্রয়োজনীয়তা বেশি।

3.প্রাইমার

রিভার্স ট্রান্সক্রিপশন প্রাইমারগুলির মধ্যে জিন-নির্দিষ্ট প্রাইমার, র্যান্ডম প্রাইমার এবং অলিগো ডিটি প্রাইমার অন্তর্ভুক্ত।বেশিরভাগ lncRNA-তে পলিএ লেজ থাকে না, এবং অলিগো ডিটি-এর সাথে র্যান্ডম প্রাইমারগুলিকে সঠিকভাবে মেলানো গুরুত্বপূর্ণ।

4.অন্যান্য উপাদান

RNA-এর অবনমিত হওয়া বিশেষভাবে সহজ এই বিষয়টির পরিপ্রেক্ষিতে, বিপরীত ট্রান্সক্রিপশন সিস্টেমে উপাদানগুলির প্রবর্তন কম করা যেতে পারে, যা কার্যকরভাবে RNase-এর প্রবেশ রোধ করতে পারে এবং বিপরীত প্রতিলিপির মসৃণ অগ্রগতি নিশ্চিত করতে পারে।

FঅরিজিনRNA টেমপ্লেট থেকে প্রাপ্ত, qPCR-তে ট্রান্সক্রিপশন বিপরীত

আপনার lncRNA সনাক্তকরণকে ব্যাপকভাবে এস্কর্ট করুন

প্রাণীর মোট RNA Iসমাধানকিট (gDNA অপসারণ কলাম সহ)

কোষের মোট RNA Iসমাধানকিট (gDNA অপসারণ কলাম সহ)

Lnc-RT HeroTM I (gDNase সহ)(lncRNA থেকে প্রথম-স্ট্র্যান্ড cDNA সংশ্লেষণের জন্য সুপার প্রিমিক্স)

রিয়েল টাইম পিসিআর ইজিটিএম-এসওয়াইবিআর গ্রীন আই

Aসুবিধা ofআরএনএ নিষ্কাশন:

কিটটি তৃতীয় প্রজন্মের RNA নিষ্কাশন প্রযুক্তি ব্যবহার করে, DNase ব্যবহার করার প্রয়োজন নেই।

96, 24, 12, এবং 6-ওয়েল প্লেট কালচারড সেল থেকে 11 মিনিট, জিডিএনএ-মুক্ত, উচ্চ-বিশুদ্ধতা, উচ্চ-মানের মোট সেল RNA-এর উচ্চ-দক্ষতা নিষ্কাশন।

lncRNA রিভার্স ট্রান্সক্রিপশনের সুবিধা:

জিনোমিক ডিএনএ দূষণ দ্রুত অপসারণের জন্য LncRNA-এর জন্য বিশেষভাবে তৈরি একটি বিপরীত প্রতিলিপি ব্যবস্থা।

রিভার্স ট্রান্সক্রিপশন সিস্টেমের উচ্চ তাপীয় স্থিতিশীলতা রয়েছে এবং এখনও 50 ডিগ্রি সেলসিয়াসে ভাল বিপরীত ট্রান্সক্রিপশন কর্মক্ষমতা রয়েছে।

উচ্চ GC সামগ্রী এবং জটিল গৌণ কাঠামো সহ টেমপ্লেটগুলি উচ্চ দক্ষতার সাথে বিপরীত করা যেতে পারে।

সুবিধাদিof qপিসিআর:

হট স্টার্ট ফোরজিন টাক পলিমারেজের উচ্চতর পরিবর্ধন দক্ষতা, উচ্চতর পরিবর্ধন সংবেদনশীলতা এবং উচ্চতর পরিবর্ধনের নির্দিষ্টতা রয়েছে

অপ্টিমাইজ করা রিয়েল পিসিআর ইজি মিক্স SYBR গ্রীন I-কে উচ্চতর শনাক্ত করার সংবেদনশীলতা তৈরি করে এবং এর ফ্লুরোসেন্সের তীব্রতা অনুরূপ পণ্যের তুলনায় 3-5 গুণ বেশি, যা বিভিন্ন ধরণের ফ্লুরোসেন্স পরিমাণগত পরীক্ষার প্রয়োজন মেটাতে পারে।