W:ভাই, বিপরীত ট্রান্সক্রিপশন সম্পন্ন হয়েছে, এবং অবশেষে শেষ ধাপ - ফ্লুরোসেন্ট পরিমাণগত পিসিআর!আরে ভাই, রিয়েল টাইম কোয়ান্টিটেটিভ পিসিআর কি?
এম:পিসিআর আপনি সবসময় জানেন, তাই না?
W:আপনি জানেন, PCR হল পলিমারেজ চেইন বিক্রিয়া, এবং এটি এমন একটি প্রযুক্তি যা DNA বৃদ্ধি করে!
M:এটি প্রায়... এটি একটি প্রযুক্তিগত পদ্ধতি যা নির্দিষ্ট প্রাইমারের মাধ্যমে লক্ষ্য ক্রমকে এক মিলিয়নেরও বেশি বারে প্রসারিত করা, কিন্তু এটি শুধুমাত্র লক্ষ্য ক্রমটির উপস্থিতি বা অনুপস্থিতি নির্দেশ করে এবং প্রাথমিক টেমপ্লেটের পরিমাণ নির্ধারণ করতে পারে না।ফ্লুরোসেন্স কোয়ান্টিটেটিভ পিসিআর এই সমস্যা সমাধানের জন্য তৈরি একটি প্রযুক্তিগত পদ্ধতি।রিয়েল টাইম PCR এবং পরিমাণ PCR (qPCR) সাধারণত এটি উল্লেখ করে।
W:সাধারণ PCR থেকে পার্থক্য ফ্লুরোসেন্স কোয়ান্টিফিকেশনে রয়েছে?
M:হ্যাঁ, অর্থাৎ, প্রতিটি পিসিআর চক্রের এক্সটেনশন পর্যায়ে, ফ্লুরোসেন্স সিগন্যালের তীব্রতা সনাক্ত করা হয় এবং প্রাথমিক টেমপ্লেটের পরিমাণ সংকেতের তীব্রতার পরিবর্তন অনুসারে গণনা করা যেতে পারে।
W: এটা এত জটিল মনে হয়!আমি নিজেই এই হিসাব করতে হবে?
M: এর জন্য আপনাকে ধীরে ধীরে শিখতে হবে, নীতিটি বুঝতে সক্ষম হওয়া সর্বোত্তম।এখন আপনি প্রথমে CT মানটিতে ফোকাস করতে পারেন, যা তুলনামূলকভাবে স্বজ্ঞাত পরীক্ষামূলক ডেটা, এবং এর আকার প্রাথমিক টেমপ্লেট পরিমাণের আকারের সাথে মিলে যায়।এছাড়াও গ্রাফ রয়েছে যেমন পরিবর্ধন বক্ররেখা এবং গলিত বক্ররেখা।আপনার পরীক্ষা সফল কি না সে বিষয়ে তাদের চূড়ান্ত সিদ্ধান্ত রয়েছে।
W: ওহ, ভাই।তারপর আমি qPCR পরীক্ষা করতে যাচ্ছি!
এম:বিকারক এলাকায় টেমপ্লেট যোগ না করার জন্য বিশেষ মনোযোগ দিন, অন্যথায় আপনার অব্যবহৃত মিশ্রণ সহজেই দূষিত হবে!
W: বুঝলাম!

রিয়েল টাইম PCR Easyᵀᴹ-SYBR Green I কিট

উচ্চ দক্ষতা, বৃহত্তর নির্দিষ্টতা
উচ্চ সংবেদনশীলতা, ভাল সামঞ্জস্য