সম্ভাব্য সমস্যার নিম্নলিখিত বিশ্লেষণবুকালswab/এফটিএ card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.
পরিশোধন কলাম আটকে আছে
এই কিটে, জিনোমিক ডিএনএ নিষ্কাশন অপারেশনে, বিশুদ্ধকরণ কলামটি সেন্ট্রিফিউগেশন ধাপ ছাড়াই নমুনা এনজাইমেটিক লাইসিস মিশ্রণে সরাসরি শোষিত হয় এবং অসম্পূর্ণ এনজাইমাইজেশন এবং নমুনার উচ্চ সান্দ্রতার কারণে পরিশোধন কলামটি ব্লক হয়ে যেতে পারে।
নিম্নলিখিত সম্ভাব্য কারণগুলি নিম্নরূপ:
1. টিস্যুর নমুনার অসম্পূর্ণ এনজাইমেটিক হজম।
সুপারিশ: ফোরজিন প্রোটিজের নমুনা প্রক্রিয়াকরণের সময় যথাযথভাবে বাড়ানো যেতে পারে বা 12,000 rpm (~13,400) এ সেন্ট্রিফিউগেশনের পরে সুপারনাট্যান্ট নেওয়া যেতে পারে× ছ) 5 মিনিটের জন্য।
2. টিস্যুর নমুনা বা বড় টিস্যুর অত্যধিক ব্যবহার।
সুপারিশ: 1 এর বেশি না হওয়াই ভালোবুকাল নমুনা মধ্যে swab;নমুনাটি খুব বড় হলে, সেই অনুযায়ী বাফার ST1, Foregene Protease, বাফার ST2 এর ডোজ বাড়ান।
3. নমুনা সান্দ্রতা খুব বেশী.
সুপারিশ: জিনোমিক ডিএনএ নিষ্কাশনের আগে নমুনাগুলিকে 10 মিমি Tris-HCl দিয়ে যথাযথভাবে পাতলা করা যেতে পারে।
4. রক্তের কার্ডের টুকরো চুষে নেওয়া হয়েছে।
সুপারিশ: ব্লাড স্পট (এফটিএ কার্ড) জিনোমিক নিষ্কাশনের ধাপ 6 এর ক্ষণস্থায়ী সেন্ট্রিফিউগেশন সময় যথাযথভাবে বাড়ানো যেতে পারে।
কম ফলন বা ডিএনএ নেই
নমুনার উৎপত্তি, নমুনা সংরক্ষণের অবস্থা, নমুনা তৈরি, ম্যানিপুলেশন ইত্যাদি সহ জিনোমিক ডিএনএ ফলনকে প্রভাবিত করে এমন বিভিন্ন কারণ রয়েছে।
নিষ্কাশনের সময় জিনোমিক ডিএনএ পাওয়া যাবে না
সম্ভাব্য কারণগুলি নিম্নরূপ:
1. নমুনাগুলির অনুপযুক্ত সংরক্ষণ বা খুব বেশি সময় ধরে স্টোরেজ জিনোমিক ডিএনএ অবক্ষয়ের দিকে পরিচালিত করে।
সুপারিশ: ওরাল swabs পছন্দ করে তাজা নমুনা করা উচিত, এবং এটি জিনোমিক DNA নিষ্কাশন অপারেশন জন্য সংরক্ষিত swabs ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয় না;রক্তের দাগের নমুনাগুলি নিশ্চিত করা উচিত যে গুণমানটি যোগ্য এবং স্টোরেজ সময় খুব বেশি দীর্ঘ হওয়া উচিত নয়।
2. খুব কম টিস্যু ব্যবহারের ফলে সংশ্লিষ্ট জিনোমিক ডিএনএ নিষ্কাশন না হতে পারে।
সুপারিশ: অনুসরণ করুনbuccal অপারেশন গাইডে swab স্যাম্পলিং নির্দেশাবলী, এবং যতবার সম্ভব মুছুন যাতে পর্যাপ্ত কোষ জিনোমিক DNA নিষ্কাশনের জন্য ওরাল সোয়াবের সাথে সংযুক্ত করা যায়;রক্তের দাগ নমুনা নিষ্কাশনের জন্য, রক্তের দাগ কাটা এলাকা যথাযথভাবে বৃদ্ধি করা যেতে পারে।
3. Foregene Protease অনুপযুক্তভাবে সংরক্ষিত হয়, যার ফলে এর কার্যকলাপ বা নিষ্ক্রিয়তা হ্রাস পায়।
সুপারিশ: স্টোরেজ শর্তাবলী নিশ্চিত করুনএফঅরিজিন প্রোটিজ বা এনজাইমেটিক প্রতিক্রিয়ার জন্য একটি নতুন ফোরজিন প্রোটিজ দিয়ে প্রতিস্থাপন করুন।
4. কিটটির অনুপযুক্ত সংরক্ষণ বা স্টোরেজ সময় খুব দীর্ঘ, ফলে কিটের কিছু উপাদান ব্যর্থ হয়।
সুপারিশ: একটি নতুন কিনুনবুকাল swab DNAআলাদা করা সম্পর্কিত পদ্ধতির জন্য কিট।
5. বাফার WB পরম ইথানল যোগ করে না।
সুপারিশ: নিশ্চিত করুন যে বাফার WB পরম ইথানলের সঠিক ভলিউম যোগ করে।
6. সিলিকন ফিল্মে ইলুয়েন্ট সঠিকভাবে যোগ করা হয় না।
সুপারিশ: 65 যোগ করুন°সেপ্রাক-উষ্ণ ইলুয়েন্ট সিলিকন ঝিল্লির মাঝখানে নেমে যায় এবং ইলুশন দক্ষতা বাড়াতে ঘরের তাপমাত্রায় 5 মিনিট রেখে দেয়।
Lজিনোমিক ডিএনএ ow-yield ভিন্ন
নিম্নলিখিত সম্ভাব্য কারণগুলি নিম্নরূপ:
1. নমুনাগুলির অনুপযুক্ত সংরক্ষণ বা খুব বেশি সময় ধরে স্টোরেজ জিনোমিক ডিএনএ অবক্ষয়ের দিকে পরিচালিত করে।
প্রস্তাবনা: মৌখিক সোয়াবগুলি পছন্দ করে নতুনভাবে নমুনা নেওয়া হয় এবং সংরক্ষিত সোয়াবগুলি জিনোমিক ডিএনএ নিষ্কাশনের জন্য ব্যবহার করা উচিত নয়।
2. টিস্যুর নমুনার পরিমাণ খুব কম হলে, নিষ্কাশিত জিনোমিক ডিএনএ সামগ্রী কম হবে।
সুপারিশ: অপারেটিং গাইডে মৌখিক স্যাম্প স্যাম্পলিং নির্দেশাবলী অনুসরণ করুন, যতবার সম্ভব মুছুন যাতে জিনোমিক ডিএনএ নিষ্কাশনের জন্য ওরাল সোয়াবের সাথে পর্যাপ্ত কোষ সংযুক্ত করা যায়।
3. Foregene Protease অনুপযুক্তভাবে সংরক্ষিত হয়, যার ফলে এর কার্যকলাপ বা নিষ্ক্রিয়তা হ্রাস পায়।
সুপারিশ: স্টোরেজ শর্তাবলী নিশ্চিত করুনthe Fঅরিজিন প্রোটিজ বা একটি নতুন দিয়ে প্রতিস্থাপন করুন এনজাইমেটিক প্রতিক্রিয়ার জন্য ফরজিন প্রোটিস।
4. Eluent সমস্যা.
সুপারিশ: ইলুশনের জন্য বাফার ইবি ব্যবহার করুন;ddH ব্যবহার করলে2O বা অন্যান্য eluents, নিশ্চিত করুন যে eluate এর pH 7.0-8.5 এর মধ্যে।
5. ইলুয়েট সঠিকভাবে ড্রপওয়াইজে যোগ করা হয়নি।
সুপারিশ: সিলিকন ঝিল্লির মাঝখানে ইলুয়েন্ট ড্রপ যোগ করুন এবং ইলুশন দক্ষতা বাড়াতে ঘরের তাপমাত্রায় 5 মিনিট রেখে দিন।
6. ইলুশন তরল খুব কম জমা হয়।
সুপারিশ: জিনোমিক ডিএনএ ইলুশনের জন্য ইলুয়েন্ট ব্যবহার করুন, অন্তত নির্দেশাবলীতে প্রয়োজনকম নাই 15 এর চেয়েμl.
Lওহ বিশুদ্ধতা of জিনোমিক ডিএনএভিন্ন
কম জিনোমিক ডিএনএ বিশুদ্ধতা ডাউনস্ট্রিম পরীক্ষাগুলির ব্যর্থতা বা অসন্তোষজনক ফলাফলের দিকে নিয়ে যেতে পারে, যেমন: এনজাইমগুলি খোলা যাবে না, পিসিআর আগ্রহের জিন খণ্ড পেতে পারে না ইত্যাদি।
সম্ভাব্য কারণগুলি নিম্নরূপ:
1. হেটেরোপ্রোটিন দূষণ, আরএনএ দূষণ।
বিশ্লেষণ: বাফার পিডব্লিউ ব্যবহার করে পরিশোধন কলাম ধোয়া হয়নি;বাফার পিডব্লিউ ওয়াশ পিউরিফিকেশন কলাম সঠিক সেন্ট্রিফিউগাল গতি ব্যবহার করে ধোয়া হয়নি।
সুপারিশ: ইথানল যোগ করার আগে সুপারন্যাট্যান্টে কোন বৃষ্টিপাত নেই তা নিশ্চিত করুন;নির্দেশাবলী অনুযায়ী পরিশোধন কলাম ধোয়া নিশ্চিত করুন, এবং এই ধাপটি বাদ দেওয়া যাবে না।
2. অপবিত্রতা আয়ন দূষণ।
বিশ্লেষণ: বাফার ডব্লিউবি ওয়াশ পরিশোধন কলাম বাদ দেওয়া হয়েছে বা শুধুমাত্র একবার ধুয়ে ফেলা হয়েছে, ফলে অবশিষ্ট আয়নিক দূষণ হয়েছে।
সুপারিশ: যতটা সম্ভব অবশিষ্ট আয়ন অপসারণের নির্দেশ অনুসারে বাফার WB 2 বার ধোয়া নিশ্চিত করুন।
3. আরএনএ এনজাইম দূষণ।
বিশ্লেষণ: বিদেশী RNase বাফার যোগ করা হয়েছে;বাফার পিডব্লিউ ওয়াশ অপারেশনটি ভুল ছিল, যার ফলে RNase অবশিষ্টাংশগুলি, ডাউনস্ট্রিম আরএনএ পরীক্ষামূলক ক্রিয়াকলাপগুলিকে প্রভাবিত করে, যেমন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশনে।
সুপারিশ: ফোরজিন সিরিজ নিউক্লিক অ্যাসিডআইসোলাtion কিট RNase এর অতিরিক্ত যোগ ছাড়াই RNA অপসারণ করতে পারে,এইভাবে বুকাল সোয়াব/এফটিএ কার্ড ডিএনএ আইসোলেশন কিটপ্রয়োজন't RNase যোগ করুন;Buffer PW ওয়াশিং পিউরিফিকেশন কলামের নির্দেশাবলী অনুসরণ করতে ভুলবেন না এবং এই ধাপটি বাদ দেওয়া যাবে না।
4. ইথানলের অবশিষ্টাংশ।
বিশ্লেষণ: বাফার ডব্লিউবি পরিশোধন কলাম ধোয়ার পরে খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশন করেনি।
সুপারিশ: নির্দেশাবলী অনুযায়ী সঠিক খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশন অপারেশন সম্পাদন করুন।
5. অন্যান্য অপবিত্রতা দূষণ.
বিশ্লেষণ: সংরক্ষিত নমুনা বা বিশেষ নমুনা প্রিট্রিটেড করা হয় না।
সুপারিশ: নির্দেশিত হিসাবে নমুনাটি পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে প্রিট্রিট করুন।
পোস্টের সময়: মার্চ-18-2022
