লেখক: ওয়াং জিয়াওয়ান, ঝাও এরিউ

ইউনিট: জিয়াওঝো হাসপাতাল, টংজি বিশ্ববিদ্যালয়ের অধিভুক্ত ডংফাং হাসপাতাল

বর্তমানে, শ্বাসযন্ত্রের প্যাথোজেন নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণের জন্য প্রধান নমুনার ধরন হল গলার সোয়াব।অনেক ধরণের সাধারণভাবে ব্যবহৃত নমুনা সংরক্ষণ সমাধান রয়েছে, যার সবকটিই পরিবহন এবং স্টোরেজের জন্য হিমায়িত বা হিমায়িত করা প্রয়োজন;সংগ্রহ এবং পরিবহন প্রক্রিয়া চলাকালীন নিম্ন তাপমাত্রার পুরো প্রক্রিয়াটি নিয়ন্ত্রণ করা কঠিন এবং নমুনা পরীক্ষার আগে মান নিয়ন্ত্রণ নিশ্চিত করা কঠিন^[১-২].

RNase (RNase) হল একটি এন্ডোনিউক্লিজ যা RNA হাইড্রোলাইজ করে, প্রধানত নিউক্লিওটাইডের মধ্যে ফসফোডিস্টার বন্ধন ছিন্ন করে।RNase অণুটি খুবই স্থিতিশীল, গঠনে ডাইসালফাইড বন্ধন রয়েছে এবং এর কার্যকলাপের জন্য ডিভালেন্ট ক্যাটেশনের উপস্থিতির প্রয়োজন হয় না, তাই RNase সহজে বিকৃত হয় না, এবং উচ্চ তাপমাত্রা বা ডিনাচুরেন্ট ব্যবহারের পরেও এটি পুনরায় তৈরি করা সহজ।RNases এন্ডোজেনাস এবং exogenous বেশী বিভক্ত করা হয়.অন্তঃসত্ত্বা RNases একই সময়ে নির্গত হতে পারে যখন কোষ ফেটে যায়।অতএব, অন্তঃসত্ত্বা RNase-এর ভূমিকা নির্মূল করা RNA নিষ্কাশন প্রক্রিয়ার একটি অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ পদক্ষেপ।Exogenous RNases ব্যাপকভাবে বিতরণ করা হয়.বাতাসে, মানুষের ত্বকে, চুলে এবং লালায় RNase বিদ্যমান, যা RNA এর সহজ অবক্ষয়ের জন্য গুরুত্বপূর্ণ কারণ।^[৩].

ডেটা কোয়েরি

CANS-CL02-A009 প্রযুক্তিগত প্রয়োজনীয়তার ক্ষেত্রে "মেডিকেল ল্যাবরেটরির গুণমান এবং দক্ষতার স্বীকৃতি নির্দেশিকাগুলির প্রয়োগ" প্রযুক্তিগত প্রয়োজনীয়তাগুলি প্রস্তাব করে যে আবেদন অনুসারে উপযুক্ত জলের গুণমান মান প্রণয়ন করা উচিত;নিষ্পত্তিযোগ্য বায়ুরোধী পাত্রে:

RNase/শ্রেণীবিন্যাস

(1) RNase A

রিবোনিউক্লিজ এ (RNase A), বোভাইন অগ্ন্যাশয় থেকে প্রাপ্ত, একটি এন্ডোরিবোনিউক্লিজ যা বিশেষভাবে RNA-তে পাইরিমিডিনের অবশিষ্টাংশের 3′ প্রান্তে আক্রমণ করতে পারে, সংলগ্ন নিউক্লিওটাইড দ্বারা গঠিত সাইটোসিন বা ইউরাসিল কাটতে পারে।ফসফোডিস্টার বন্ড, বিক্রিয়ার চূড়ান্ত পণ্য হল একটি 3′ পাইরিমিডিন নিউক্লিওটাইড এবং একটি অলিগোনিউক্লিওটাইড যার শেষে 3′ পাইরিমিডিন নিউক্লিওটাইড থাকে।

(2) RNase T1

Ribonuclease T1 (RNase T1) Aspergillus orjzae থেকে প্রাপ্ত, এটি বিশেষভাবে গুয়ানিনের 3′-টার্মিনাল ফসফেটের উপর কাজ করে এবং ক্লিভেজ সাইটটি গুয়ানিনের 3′ ফসফেট এবং সংলগ্ন 5′ হাইড্রোক্সিলের মধ্যে অবস্থিত।বিক্রিয়ার চূড়ান্ত গুণফল হল 3′গুয়ানিলিক অ্যাসিড এবং শেষে 3′গুয়ানিলিক অ্যাসিড সহ অলিগোনিউক্লিওটাইড টুকরা।

(3) RNase H

Ribonuclease H (RNase H) প্রথম বাছুরের থাইমাস টিস্যু থেকে আবিষ্কৃত হয়েছিল এবং এর এনকোডিং জিনটি Escherichia coli-তে ক্লোন করা হয়েছে।এটি বিশেষভাবে ডিএনএকে অবনমিত করতে পারে: আরএনএ হাইব্রিড ডুপ্লেক্সে আরএনএ স্ট্র্যান্ড, যার ফলে 3′-OH এবং 5′-মনোফসফেট শেষ সহ অলিগোনিউক্লিওটাইড এবং মনোনিউক্লিওটাইড হয়, এটি একক- বা ডাবল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএ বা আরএনএকে অবনমিত করতে পারে না।

RNase

ফাংশন এবং ব্যবহার

রিবোনিউক্লিজ রাইবোনিউক্লিক অ্যাসিড (আরএনএ) এর অবক্ষয়কে অনুঘটক করতে পারে এবং কৃত্রিমভাবে সংশ্লেষিত হতে পারে।ট্রমা এবং জয়েন্টের ব্যথার চিকিত্সার জন্য ঔষধি মলমটি টপিক্যালি ব্যবহার করা হয়।রিপোর্ট অনুযায়ী, রাইবোনিউক্লিজ হোস্ট কোষের বিপাক পরিবর্তন করতে পারে, ভাইরাস সংশ্লেষণকে বাধা দিতে পারে, ভিট্রোতে ইনফ্লুয়েঞ্জা ভাইরাসের বিস্তারকে বাধা দিতে পারে এবং মুরগির ভ্রূণে ভ্যাক্সিনিয়া এবং হারপিস ভাইরাস গঠনে বাধা দিতে পারে।180 মিলিগ্রামের দৈনিক ইনট্রামাসকুলার ইনজেকশন রাইবোনিউক্লিজের ক্লিনিক্যাল ব্যবহার, মহামারী এনসেফালাইটিসের চিকিত্সার জন্য উপকারী, রাইবোনিউক্লিজ রাইবোনিউক্লিক অ্যাসিড (RNA) এর অবক্ষয়কে অনুঘটক করতে পারে এবং এখন কৃত্রিমভাবে সংশ্লেষিত হতে পারে।ট্রমা এবং জয়েন্টের ব্যথার চিকিত্সার জন্য ঔষধি মলমটি টপিক্যালি ব্যবহার করা হয়।রিপোর্ট অনুযায়ী, রাইবোনিউক্লিজ হোস্ট কোষের বিপাক পরিবর্তন করতে পারে, ভাইরাস সংশ্লেষণকে বাধা দিতে পারে, ভিট্রোতে ইনফ্লুয়েঞ্জা ভাইরাসের বিস্তারকে বাধা দিতে পারে এবং মুরগির ভ্রূণে ভ্যাক্সিনিয়া এবং হারপিস ভাইরাস গঠনে বাধা দিতে পারে।মহামারী এনসেফালাইটিসের চিকিত্সার জন্য 180 মিলিগ্রামের দৈনিক ইন্ট্রামাসকুলার ইনজেকশন রিবোনুক্লিজের ক্লিনিক্যাল ব্যবহার উপকারী।

RNase

ইনহিবিটর সংজ্ঞা

RNase ইনহিবিটর ইউনিটের সংজ্ঞা: 5ng RNase A-এর কার্যকলাপের 50% বাধা দেওয়ার জন্য প্রয়োজনীয় এনজাইমের পরিমাণ হল এক ইউনিট।

কিভাবে RNase ইনহিবিটার কাজ করে

গুয়ানিডিন আইসোথিওসায়ানেট:

গুয়ানিডিন আইসোথিওসায়ানেট হল একটি জৈব যৌগ যার আণবিক সূত্র C2H6N4S।প্রধানত জৈবিক ওষুধ, রাসায়নিক বিকারক, ইত্যাদিতে ব্যবহৃত হয়। গুয়ানিডিন আইসোথিওসায়ানেট হল একটি প্রোটিন লাইজিং এজেন্ট এবং এটি প্রায়ই আণবিক ডায়গনিস্টিক রিএজেন্টগুলিতে লাইসিস দ্রবণের প্রধান উপাদান হিসাবে ব্যবহৃত হয়।এটি টিস্যু লাইস করতে পারে, কোষের গঠন ধ্বংস করতে পারে এবং নিউক্লিওপ্রোটিন থেকে নিউক্লিক অ্যাসিডকে বিচ্ছিন্ন করতে পারে এবং RNase-তে শক্তিশালী বিকৃতকরণ রয়েছে।এটি বর্তমানে সবচেয়ে কার্যকর RNase ইনহিবিটার।

TRIzol হল একটি নতুন মোট RNA নিষ্কাশন বিকারক যা সরাসরি কোষ বা টিস্যু থেকে মোট RNA বের করতে পারে।এটিতে ফেনল এবং গুয়ানিডিন আইসোথিওসায়ানেটের মতো পদার্থ রয়েছে, যা কোষগুলিকে দ্রুত ব্যাহত করতে পারে এবং কোষ দ্বারা নিঃসৃত নিউক্লিয়াসকে বাধা দিতে পারে।

(তবে, গুয়ানিডিন আইসোথিওসায়ানেট ল্যাব গবেষকদের স্বাস্থ্যের জন্য বিপজ্জনক।)

আর নাসিন:

ইঁদুরের লিভার বা মানুষের ব্লাস্টোডার্ম থেকে বের করা অ্যাসিড গ্লাইকোপ্রোটিন।Rnasin হল RNase-এর একটি অ-প্রতিযোগীতামূলক ইনহিবিটর, যা বিভিন্ন RNase-কে নিষ্ক্রিয় করতে তাদের সাথে আবদ্ধ হতে পারে।

(আরো বিশদ: https://www.foreivd.com/foreasy-rnase-inhibitor-product/)

Hউচ্চ তাপমাত্রা:

উচ্চ তাপমাত্রাও প্রোটিন বিকৃতকরণের একটি সাধারণ উপায়।

ডাইথাইলপাইরোকার্বনেট (DEPC):

DEPC একটি শক্তিশালী কিন্তু অসম্পূর্ণ RNase ইনহিবিটর, যেটি RNase সক্রিয় গ্রুপের অ্যামিনো অ্যাসিড ইমিডাজল রিং-এর সাথে প্রোটিনগুলিকে ডিনেচার করার মাধ্যমে RNase কার্যকলাপকে বাধা দিতে পারে।

ভ্যানাডিল রিবোনিউক্লিওসাইড কমপ্লেক্স:

ভ্যানডিয়াম অক্সাইড আয়ন এবং নিউক্লিওসাইড দ্বারা গঠিত একটি জটিল, যা রূপান্তর পদার্থের আকারে RNase-এর সাথে আবদ্ধ হয়, যা RNase-এর কার্যকলাপকে প্রায় সম্পূর্ণরূপে বাধা দিতে পারে।

অন্যান্য:

SDS, ইউরিয়া, ডায়াটোমাসিয়াস আর্থ ইত্যাদিরও RNase এর উপর একটি নির্দিষ্ট বাধা প্রভাব রয়েছে।

বিশেষজ্ঞ পর্যালোচনা

লি ইউজি চিফ টেকনিশিয়ান

ল্যাবরেটরি বিভাগের পরিচালক, জিয়াওঝো হাসপাতাল, টংজি বিশ্ববিদ্যালয়ের অধিভুক্ত ডংফাং হাসপাতাল

বহির্মুখী RNase এর জৈব অবক্ষয় রোধ করার জন্য, মুখোশ, গ্লাভস এবং টুপি পরা উচিত এবং RNA নিষ্কাশন প্রক্রিয়ার সময় ঘন ঘন প্রতিস্থাপন করা উচিত।সমস্ত কাচের পাত্র একটি শুকানোর ওভেনে 200°C তাপমাত্রায় 2 ঘন্টার বেশি বেক করতে হবে।বেকিং এর জন্য ব্যবহৃত উপকরণ, যেমন প্লাস্টিক, DEPC জল দিয়ে শোধন করা প্রয়োজন, এবং তারপর পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে ফেলতে হবে।RNA নিষ্কাশন, সংরক্ষণ এবং সনাক্তকরণের জন্য ব্যবহৃত রিএজেন্ট বা ডিভাইসগুলি RNA-কে উৎসর্গ করা উচিত এবং একটি স্বাধীন RNA অপারেশন এলাকা স্থাপন করা উচিত।

তথ্যসূত্র:

[১] স্মিথ-ভন এইচসি, বিঙ্কস এমজে, বেইসবার্থ জে, এট আল।আদিবাসী অস্ট্রেলিয়ান শিশুদের মধ্যে তীব্র নিম্ন শ্বাসযন্ত্রের সংক্রমণ শুরু হওয়ার অবিলম্বে নাসোফারিক্সে ব্যাকটেরিয়া এবং ভাইরাস।Eur J Clin Microbiol Infect Dis,2018,37 (9): 1785-1794।

[২] চাইনিজ প্রিভেন্টিভ মেডিসিন অ্যাসোসিয়েশনের হাসপাতাল সংক্রমণ নিয়ন্ত্রণ শাখা।ক্লিনিকাল মাইক্রোবিয়াল নমুনা সংগ্রহ এবং পরিদর্শনের জন্য নির্দেশিকা [জে]।চাইনিজ জার্নাল অফ হসপিটাল ইনফেকশন, 2018(20):3192-3200।

[৩] "ক্লিনিক্যাল টেস্ট দশ হাজার কেন মলিকুলার বায়োলজি টেস্ট ভলিউম"