প্রাদুর্ভাবের প্রাথমিক পর্যায়ে, দ্রুত বিকাশের কারণে, সন্দেহভাজন রোগীদের দ্রুত নির্ণয় কোভিড-১৯ প্রতিরোধের চাবিকাঠি।কিছু অনুমোদিত নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ বিকারকগুলির বিকাশের সময় কম থাকে এবং দ্রুত কর্মক্ষমতা নিশ্চিতকরণ, অপর্যাপ্ত বিকারক অপ্টিমাইজেশন এবং ব্যাচগুলির মধ্যে বড় পার্থক্যের মতো সমস্যা রয়েছে;নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ প্রক্রিয়ার বিভিন্ন দিকগুলিতে বিভিন্ন ক্লিনিকাল পরীক্ষাগারের সমস্যাগুলি নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণের ফলাফলের নির্ভুলতাকেও প্রভাবিত করতে পারে।এই নিবন্ধটি বর্তমান SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণের মূল লিঙ্ক এবং পয়েন্টগুলিতে ফোকাস করবে এবং পরীক্ষাগার নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ এবং ক্লিনিকাল অসঙ্গতির মিথ্যা নেতিবাচক এবং ইতিবাচক পুনরায় পরীক্ষার সমস্যাগুলি বিশ্লেষণ করবে।

SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণের নীতি

SARS-CoV-2 হল একটি RNA ভাইরাস যার জিনোম সিকোয়েন্স প্রায় 29 kb, 10 টি জিন সহ, যা কার্যকরভাবে 10 টি প্রোটিনকে এনকোড করতে পারে।ভাইরাসগুলি আরএনএ এবং প্রোটিন দ্বারা গঠিত, এবং সবচেয়ে বাইরের স্তরটি লিপিড এবং গ্লাইকোপ্রোটিন দ্বারা গঠিত একটি বাইরের আবরণ।ভিতরে, প্রোটিন ক্যাপসিড এটিতে আরএনএকে আবৃত করে, যার ফলে সহজেই হ্রাসযোগ্য আরএনএ (P1) রক্ষা করে।

P1 SARS-COV-2 এর গঠন

ভাইরাস সংক্রমণের জন্য নির্দিষ্ট কোষের পৃষ্ঠের রিসেপ্টরগুলির মাধ্যমে কোষ আক্রমণ করে এবং প্রতিলিপি তৈরি করতে হোস্ট কোষ ব্যবহার করে।

ভাইরাল নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণের নীতি হল একটি সেল লাইসেটের মাধ্যমে ভাইরাল আরএনএ প্রকাশ করা এবং তারপর সনাক্তকরণের জন্য রিয়েল-টাইম ফ্লুরোসেন্ট রিভার্স ট্রান্সক্রিপশন-পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন (RT-PCR) ব্যবহার করা।

সনাক্তকরণের নীতির মূল চাবিকাঠি হল নিউক্লিক অ্যাসিড সিকোয়েন্সের "লক্ষ্যযুক্ত ম্যাচিং" অর্জনের জন্য প্রাইমার এবং প্রোব ব্যবহার করা, অর্থাৎ, SARS-CoV-2-এর নিউক্লিক অ্যাসিড সিকোয়েন্স খুঁজে বের করা যা প্রায় 30,000 ঘাঁটিতে অন্যান্য ভাইরাস থেকে আলাদা (অন্যান্য ভাইরাসের সাথে নিউক্লিক অ্যাসিডের সাদৃশ্য), "প্রোব এলাকা" এবং "প্রোব এরিয়া" ডিজাইন।

প্রাইমার এবং প্রোবগুলি SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিডের নির্দিষ্ট অঞ্চলের সাথে অত্যন্ত মেলে, অর্থাৎ, নির্দিষ্টতা খুব শক্তিশালী।একবার পরীক্ষা করা নমুনার রিয়েল-টাইম ফ্লুরোসেন্ট RT-PCR পরিবর্ধন ফলাফল ইতিবাচক হলে, এটি প্রমাণ করে যে SARS-CoV-2 নমুনায় উপস্থিত রয়েছে।দেখুন P2।

SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড নির্ধারণের P2 ধাপ (রিয়েল-টাইম ফ্লুরোসেন্ট RT-PCR)

SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণের জন্য পরীক্ষাগারের শর্ত এবং প্রয়োজনীয়তা

নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষাগারগুলি নেতিবাচক চাপের পরিবেশের জন্য সবচেয়ে আদর্শ, এবং তাদের চাপ পর্যবেক্ষণে মনোযোগ দেওয়া উচিত, বায়ু প্রবাহিত রাখা এবং অ্যারোসলগুলি নির্মূল করা উচিত।নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষার কর্মীদের অবশ্যই সংশ্লিষ্ট যোগ্যতা থাকতে হবে, প্রাসঙ্গিক পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া প্রশিক্ষণ গ্রহণ করতে হবে এবং মূল্যায়ন পাস করতে হবে।পরীক্ষাগার কঠোরভাবে পরিচালিত হওয়া উচিত, জায়গায় জোন করা উচিত এবং অপ্রাসঙ্গিক কর্মীদের প্রবেশে কঠোরভাবে নিষেধ করা হয়েছে।পরিষ্কার এলাকা বায়ুচলাচল এবং জায়গায় জীবাণুমুক্ত করা উচিত।প্রাসঙ্গিক আইটেমগুলি জোনে স্থাপন করা হয়, পরিষ্কার এবং নোংরা আলাদা করা হয়, সময়মতো প্রতিস্থাপন করা হয় এবং জায়গায় দূষিত করা হয়।নিয়মিত জীবাণুমুক্তকরণ: ক্লোরিনযুক্ত জীবাণুনাশক হল বড় এলাকার জন্য প্রধান সমাধান, এবং 75% অ্যালকোহল ছোট এলাকার জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে।অ্যারোসলের সাথে মোকাবিলা করার একটি ভাল উপায় হল বায়ুচলাচলের জন্য জানালা খোলা, এবং বায়ু নির্বীজন অতিবেগুনী রশ্মি, পরিস্রাবণ এবং বায়ু নির্বীজন এর মাধ্যমেও করা যেতে পারে।

SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড নির্ধারণের মূল লিঙ্ক এবং পরামিতি (রিয়েল-টাইম ফ্লুরোসেন্ট RT-PCR)

যদিও পরীক্ষাগারগুলি সাধারণত নিউক্লিক অ্যাসিড "সনাক্তকরণ" এর প্রতি গভীর মনোযোগ দেয়, প্রকৃতপক্ষে, নিউক্লিক অ্যাসিড "নিষ্কাশন" সফল সনাক্তকরণের অন্যতম প্রধান পদক্ষেপ, যা ভাইরাসের নমুনা সংগ্রহ এবং সংরক্ষণের সাথে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত।

বর্তমানে, সর্বাধিক ব্যবহৃত শ্বাসযন্ত্রের নমুনা, যেমন নাসোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব, দ্বিতীয় পদ্ধতি ব্যবহার করে, যা নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং লাইসিস সমাধানের উপর ভিত্তি করে তৈরি একটি নিষ্ক্রিয়করণ (সংরক্ষণ) সমাধান।একদিকে, এই ভাইরাস সংরক্ষণ দ্রবণ ভাইরাসের প্রোটিনকে বিকৃত করতে পারে, এর কার্যকলাপ হারাতে পারে এবং আর সংক্রামক হতে পারে না এবং পরিবহন এবং সনাক্তকরণ পর্যায়ের নিরাপত্তা উন্নত করতে পারে;অন্যদিকে, এটি নিউক্লিক অ্যাসিড মুক্ত করতে, নিউক্লিক অ্যাসিড পচনশীল এনজাইমকে নির্মূল করতে এবং ভাইরাস প্রতিরোধ করতে সরাসরি ভাইরাসকে ফাটতে পারে।আরএনএ ক্ষয়প্রাপ্ত হয়।

নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন লাইসিস সমাধানের ভিত্তিতে তৈরি একটি ভাইরাস স্যাম্পলিং দ্রবণ।প্রধান উপাদানগুলি হল সুষম লবণ, ইথিলেনেডিয়ামাইনটেট্রাসেটিক অ্যাসিড চেলেটিং এজেন্ট, গুয়ানিডিন লবণ (গুয়ানিডিন আইসোথিওসায়ানেট, গুয়ানিডিন হাইড্রোক্লোরাইড, ইত্যাদি), অ্যানিওনিক সার্ফ্যাক্ট্যান্ট (ডোডেকেন) সোডিয়াম সালফেট), ক্যাটানিক সার্ফ্যাক্ট্যান্ট (টেট্রাডেসিল ট্রাইমিথোলাইন, অ্যামিথিয়েল, অ্যামিথিয়েল, অ্যামিথিয়েন-8)। রিটল, প্রোটিনেস কে এবং অন্যান্য বেশ কয়েকটি বা তার বেশি উপাদান।বর্তমানে, অনেক ধরণের নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন কিট রয়েছে এবং বিভিন্ন নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং পরিশোধন বিকারক ব্যবহার করা হয়।এমনকি একই নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং পরিশোধন বিকারক ব্যবহার করা হলেও, প্রতিটি কিটের নিষ্কাশন পদ্ধতি ভিন্ন।

বর্তমানে, ন্যাশনাল মেডিকেল প্রোডাক্টস অ্যাডমিনিস্ট্রেশন দ্বারা অনুমোদিত নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ কিট পণ্যগুলি SARS-CoV-2 জিনোমের ORF1ab, E এবং N জিনের উপর ভিত্তি করে নির্বাচন করা হয়েছে।বিভিন্ন পণ্যের সনাক্তকরণের নীতিগুলি মূলত একই, তবে তাদের প্রাইমার এবং প্রোবের নকশা ভিন্ন।একক-টার্গেট সেগমেন্ট (ORF1ab), ডুয়াল-টার্গেট সেগমেন্ট (ORF1ab, N বা E), এবং তিন-টার্গেট সেগমেন্ট (ORF1ab, N এবং E) আছে।সনাক্তকরণ এবং ব্যাখ্যা, নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং রিয়েল-টাইম ফ্লুরোসেন্ট RT-PCR প্রতিক্রিয়া সিস্টেমের মধ্যে পার্থক্য প্রাসঙ্গিক কিট নির্দেশাবলী উল্লেখ করা উচিত, এবং এটি সুপারিশ করা হয় যে ব্যবহারকারীরা ব্যাখ্যার জন্য কিট নির্দেশাবলীতে উল্লেখিত ব্যাখ্যা পদ্ধতি কঠোরভাবে অনুসরণ করুন।রিয়েল-টাইম ফ্লুরোসেন্ট RT-PCR দ্বারা পরিবর্ধিত সাধারণ অঞ্চল, প্রাইমার এবং প্রোব সিকোয়েন্সগুলি P3 এ দেখানো হয়েছে।

P3 জিনোমে SARS-CoV-2 অ্যামপ্লিকন টার্গেটের অবস্থান এবং প্রাইমার এবং প্রোবের ক্রম

SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড নির্ধারণের ফলাফলের ব্যাখ্যা (Real-Time ফ্লুরোসেন্ট RT-PCR)

"সারস-কোভি-২ সংক্রমণের জন্য নিউমোনিয়া প্রতিরোধ ও নিয়ন্ত্রণ পরিকল্পনা (দ্বিতীয় সংস্করণ)" প্রথমবারের মতো একক জিন পরিবর্ধনের ফলাফল বিচারের মানদণ্ড স্পষ্ট করেছে:

1. কোন Ct বা Ct≥40 নেতিবাচক নয়;

2. Ct<37 ইতিবাচক;

3. 37-40 এর Ct মান হল ধূসর-স্কেল এলাকা।পরীক্ষার পুনরাবৃত্তি করার পরামর্শ দেওয়া হয়।যদি Ct<40 পুনরায় করার ফলাফল এবং পরিবর্ধন বক্ররেখা সুস্পষ্ট শিখর থাকে, তাহলে নমুনাটিকে ইতিবাচক হিসাবে বিচার করা হবে, অন্যথায় এটি নেতিবাচক।"

গাইডের তৃতীয় সংস্করণ এবং গাইডের চতুর্থ সংস্করণ উপরোক্ত মানদণ্ড অব্যাহত রেখেছে।যাইহোক, বাণিজ্যিক কিটগুলিতে ব্যবহৃত বিভিন্ন লক্ষ্যগুলির কারণে, নির্দেশিকাটির উপরে উল্লিখিত 3য় সংস্করণ লক্ষ্যগুলির সংমিশ্রণ নির্ধারণের মানদণ্ড দেয়নি, জোর দিয়ে প্রস্তুতকারকের দেওয়া নির্দেশাবলী প্রাধান্য পাবে৷নির্দেশিকাগুলির পঞ্চম সংস্করণ থেকে শুরু করে, দুটি লক্ষ্য স্পষ্ট করা হয়েছে, বিশেষ করে একটি একক লক্ষ্যের বিচারের মানদণ্ড যা বিচার করা কঠিন।অর্থাৎ, ল্যাবরেটরি যদি নিশ্চিত করতে চায় যে SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণের জন্য একটি কেস ইতিবাচক, তাহলে নিম্নলিখিতটি 2টির মধ্যে 1টি শর্ত পূরণ করতে হবে:

(1) একই নমুনায় SARS-CoV-2 (ORF1ab, N) এর দুটি লক্ষ্য রিয়েল-টাইম ফ্লুরোসেন্ট RT-PCR দ্বারা ইতিবাচক পরীক্ষা করা হয়েছে।যদি একটি একক লক্ষ্য ইতিবাচক হয়, পুনরায় নমুনা এবং পুনরায় পরীক্ষা প্রয়োজন।যদি পরীক্ষার ফলাফল হয় যদি একক লক্ষ্য এখনও ইতিবাচক হয়, এটি ইতিবাচক হিসাবে বিচার করা হয়।

(2) রিয়েল-টাইম ফ্লুরোসেন্ট RT-PCR-এর দুটি নমুনা একই সময়ে একটি একক লক্ষ্য পজিটিভ দেখিয়েছে বা একই ধরণের দুটি নমুনা একটি একক লক্ষ্য পজিটিভ পরীক্ষার ফলাফল দেখিয়েছে, যা ইতিবাচক হিসাবে বিচার করা যেতে পারে।যাইহোক, নির্দেশিকাগুলি আরও জোর দেয় যে নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষার নেতিবাচক ফলাফল SARS-CoV-2 সংক্রমণকে বাদ দিতে পারে না।যে কারণগুলি মিথ্যা নেতিবাচক কারণ হতে পারে সেগুলিকে বাদ দেওয়া দরকার, যার মধ্যে রয়েছে নিম্নমানের নমুনার গুণমান (অরোফ্যারিনক্স এবং অন্যান্য অংশ থেকে শ্বাস-প্রশ্বাসের নমুনা), নমুনা সংগ্রহ খুব তাড়াতাড়ি বা খুব দেরিতে, নমুনাগুলি সংরক্ষণ, পরিবহন এবং সঠিকভাবে প্রক্রিয়া করা হয়নি এবং প্রযুক্তিরই সমস্যা ছিল (ভাইরাস বৈচিত্র্য, PCR বাধা) ইত্যাদি।

SARS-CoV-2 সনাক্তকরণে মিথ্যা নেতিবাচক কারণ

নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষায় "মিথ্যা নেতিবাচক" ধারণাটি যা বর্তমানে উদ্বিগ্ন, প্রায়শই "মিথ্যা নেতিবাচক" বোঝায় যেখানে নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষার ফলাফল ক্লিনিকাল প্রকাশের সাথে অসামঞ্জস্যপূর্ণ, অর্থাৎ ক্লিনিকাল লক্ষণ এবং ইমেজিং ফলাফলগুলি COVID-19-এর জন্য অত্যন্ত সন্দেহজনক, কিন্তু নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষাগুলি সর্বদা "নেতিবাচক" হয়।জাতীয় স্বাস্থ্য কমিশনের ক্লিনিকাল ল্যাবরেটরি সেন্টার "মিথ্যা নেতিবাচক" SARS-CoV-2 পরীক্ষার ব্যাখ্যা দিয়েছে।

(1) আক্রান্ত ব্যক্তির কোষে নির্দিষ্ট পরিমাণে ভাইরাস থাকে।বিদ্যমান তথ্যগুলি দেখায় যে ভাইরাস দ্বারা শরীরে আক্রান্ত হওয়ার পরে, ভাইরাসটি নাক এবং মুখ দিয়ে গলায় প্রবেশ করে, তারপরে শ্বাসনালী এবং ব্রঙ্কাইতে এবং তারপর অ্যালভিওলিতে পৌঁছায়।সংক্রামিত ব্যক্তি ইনকিউবেশন পিরিয়ড, হালকা লক্ষণ এবং তারপরে গুরুতর লক্ষণগুলির প্রক্রিয়া এবং রোগের বিভিন্ন পর্যায়ে অনুভব করবেন।আর শরীরের বিভিন্ন অংশে ভাইরাসের উপস্থিতির পরিমাণ আলাদা।

কোষের ধরণের ভাইরাল লোডের পরিপ্রেক্ষিতে, অ্যালভিওলার এপিথেলিয়াল কোষ (নিম্ন শ্বাসযন্ত্রের ট্র্যাক্ট) > এয়ারওয়ে এপিথেলিয়াল কোষ (উপরের শ্বাসযন্ত্রের ট্র্যাক্ট) > ফাইব্রোব্লাস্ট, এন্ডোথেলিয়াল কোষ এবং ম্যাক্রোফেজ ইত্যাদি;নমুনার ধরন থেকে, অ্যালভিওলার ল্যাভেজ ফ্লুইড (সবচেয়ে চমৎকার)>গভীর কাশির থুতু>নাসোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব>অরোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব>রক্ত।এছাড়া মলের মধ্যেও ভাইরাস শনাক্ত করা যায়।যাইহোক, অপারেশনের সুবিধা এবং রোগীদের গ্রহণযোগ্যতা বিবেচনা করে, সাধারণভাবে ব্যবহৃত ক্লিনিকাল নমুনা অর্ডার হল অরোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব>নাসোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব>ব্রঙ্কিয়াল ল্যাভেজ ফ্লুইড (জটিল অপারেশন) এবং গভীর থুতু (সাধারণত শুষ্ক কাশি, পাওয়া কঠিন)।

তাই, কিছু রোগীর অরোফ্যারিনক্স বা নাসোফারিনক্সের কোষে ভাইরাসের পরিমাণ কম বা অত্যন্ত কম।যদি শুধুমাত্র অরোফ্যারিনক্স বা নাসোফারিক্সের নমুনা পরীক্ষার জন্য নেওয়া হয়, তবে ভাইরাল নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্ত করা যাবে না।

(2) নমুনা সংগ্রহের সময় কোনও ভাইরাসযুক্ত কোষ সংগ্রহ করা হয়নি, বা ভাইরাল নিউক্লিক অ্যাসিড কার্যকরভাবে সংরক্ষণ করা হয়নি।

[① অনুপযুক্ত সংগ্রহের স্থান, উদাহরণস্বরূপ, অরোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব সংগ্রহ করার সময়, সংগ্রহের গভীরতা যথেষ্ট নয়, সংগৃহীত ন্যাসোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াবগুলি অনুনাসিক গহ্বরের গভীরে সংগ্রহ করা হয় না, ইত্যাদি। সংগৃহীত বেশিরভাগ কোষ ভাইরাসমুক্ত কোষ হতে পারে;

②স্যাম্পলিং swabs ভুলভাবে ব্যবহার করা হয়.উদাহরণস্বরূপ, সিন্থেটিক ফাইবার যেমন PE ফাইবার, পলিয়েস্টার ফাইবার এবং পলিপ্রোপিলিন ফাইবার সোয়াব হেডের উপাদানের জন্য সুপারিশ করা হয়।তুলার মতো প্রাকৃতিক ফাইবারগুলি প্রকৃত অপারেশনে ব্যবহৃত হয় (প্রোটিনের শক্তিশালী শোষণ এবং ধোয়া সহজ নয়) এবং নাইলন ফাইবার (দরিদ্র জল শোষণ, যার ফলে নমুনার পরিমাণ অপর্যাপ্ত হয়);

③ভাইরাস স্টোরেজ টিউবগুলির ভুল ব্যবহার, যেমন পলিপ্রোপিলিন বা পলিথিন প্লাস্টিক স্টোরেজ টিউবগুলির অপব্যবহার যা নিউক্লিক অ্যাসিড (DNA/RNA) শোষণ করা সহজ, ফলে স্টোরেজ দ্রবণে নিউক্লিক অ্যাসিডের ঘনত্ব হ্রাস পায়।অনুশীলনে, ভাইরাল নিউক্লিক অ্যাসিড সংরক্ষণের জন্য পলিথিন-প্রোপাইলিন পলিমার প্লাস্টিক এবং কিছু বিশেষভাবে চিকিত্সা করা পলিপ্রোপিলিন প্লাস্টিকের পাত্রে ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়।]

[① অনুপযুক্ত সংগ্রহের স্থান, উদাহরণস্বরূপ, অরোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব সংগ্রহ করার সময়, সংগ্রহের গভীরতা যথেষ্ট নয়, সংগৃহীত ন্যাসোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াবগুলি অনুনাসিক গহ্বরের গভীরে সংগ্রহ করা হয় না, ইত্যাদি। সংগৃহীত বেশিরভাগ কোষ ভাইরাসমুক্ত কোষ হতে পারে;

②স্যাম্পলিং swabs ভুলভাবে ব্যবহার করা হয়.উদাহরণস্বরূপ, সিন্থেটিক ফাইবার যেমন PE ফাইবার, পলিয়েস্টার ফাইবার এবং পলিপ্রোপিলিন ফাইবার সোয়াব হেডের উপাদানের জন্য সুপারিশ করা হয়।তুলার মতো প্রাকৃতিক ফাইবারগুলি প্রকৃত অপারেশনে ব্যবহৃত হয় (প্রোটিনের শক্তিশালী শোষণ এবং ধোয়া সহজ নয়) এবং নাইলন ফাইবার (দরিদ্র জল শোষণ, যার ফলে নমুনার পরিমাণ অপর্যাপ্ত হয়);

③ভাইরাস স্টোরেজ টিউবগুলির ভুল ব্যবহার, যেমন পলিপ্রোপিলিন বা পলিথিন প্লাস্টিক স্টোরেজ টিউবগুলির অপব্যবহার যা নিউক্লিক অ্যাসিড (DNA/RNA) শোষণ করা সহজ, ফলে স্টোরেজ দ্রবণে নিউক্লিক অ্যাসিডের ঘনত্ব হ্রাস পায়।অনুশীলনে, ভাইরাল নিউক্লিক অ্যাসিড সংরক্ষণের জন্য পলিথিন-প্রোপাইলিন পলিমার প্লাস্টিক এবং কিছু বিশেষভাবে চিকিত্সা করা পলিপ্রোপিলিন প্লাস্টিকের পাত্রে ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়।]

(4) ক্লিনিকাল পরীক্ষাগার অপারেশন মানসম্মত নয়।পরীক্ষার ফলাফলের নির্ভুলতা এবং নির্ভরযোগ্যতা নিশ্চিত করার জন্য নমুনা পরিবহন এবং স্টোরেজ শর্তাবলী, ক্লিনিকাল পরীক্ষাগারগুলির প্রমিত অপারেশন, ফলাফলের ব্যাখ্যা এবং মান নিয়ন্ত্রণ হল মূল কারণ।16-24 মার্চ, 2020 তারিখে জাতীয় স্বাস্থ্য কমিশনের ক্লিনিক্যাল ল্যাবরেটরি সেন্টার দ্বারা পরিচালিত বাহ্যিক গুণমান মূল্যায়নের ফলাফল অনুসারে, বৈধ ফলাফল পাওয়া 844টি পরীক্ষাগারের মধ্যে 701টি (83.1%) যোগ্য এবং 143টি (16.9%) ছিল না।যোগ্য, সামগ্রিক পরীক্ষাগার পরীক্ষার অবস্থা ভাল, কিন্তু বিভিন্ন পরীক্ষাগারে এখনও কর্মীদের অপারেশন ক্ষমতা, একক-টার্গেট ইতিবাচক নমুনা ব্যাখ্যা করার ক্ষমতা এবং মান নিয়ন্ত্রণের মধ্যে পার্থক্য রয়েছে।

SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণের মিথ্যা নেতিবাচক কীভাবে হ্রাস করবেন?

নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণে মিথ্যা নেতিবাচক হ্রাস করা মিথ্যা নেতিবাচক উত্পাদনের চারটি দিক থেকে অপ্টিমাইজ করা উচিত।

(1) আক্রান্ত ব্যক্তির কোষে নির্দিষ্ট পরিমাণে ভাইরাস থাকে।সন্দেহভাজন সংক্রামিত ব্যক্তির শরীরের বিভিন্ন অংশে ভাইরাসের ঘনত্ব বিভিন্ন সময়ে ভিন্ন হবে।যদি গলবিল না থাকে তবে এটি ব্রঙ্কিয়াল ল্যাভেজ তরল বা মলের মধ্যে হতে পারে।যদি পরীক্ষার জন্য একই সময়ে বা রোগের অগ্রগতির বিভিন্ন পর্যায়ে একাধিক ধরনের নমুনা সংগ্রহ করা যায়, তাহলে মিথ্যা নেতিবাচক এড়াতে সাহায্য করবে।

(2) নমুনা সংগ্রহের সময় ভাইরাসযুক্ত কোষ সংগ্রহ করতে হবে।নমুনা সংগ্রহকারীদের প্রশিক্ষণকে শক্তিশালী করার মাধ্যমে এই সমস্যাটি অনেকাংশে সমাধান করা যেতে পারে।

(3) নির্ভরযোগ্য IVD বিকারক।জাতীয় স্তরে বিকারকগুলির সনাক্তকরণ কার্যক্ষমতা মূল্যায়নের উপর গবেষণা চালিয়ে এবং বিদ্যমান সমস্যাগুলি নিয়ে আলোচনা করে, বিকারকগুলির সনাক্তকরণ দক্ষতা আরও উন্নত করা যেতে পারে এবং বিশ্লেষণের সংবেদনশীলতা উন্নত করা যেতে পারে।

(4) ক্লিনিকাল ল্যাবরেটরির প্রমিত অপারেশন।পরীক্ষাগার কর্মীদের প্রশিক্ষণকে শক্তিশালী করে, পরীক্ষাগারের গুণমান ব্যবস্থাপনা ব্যবস্থাকে ক্রমাগত উন্নত করে, যুক্তিসঙ্গত বিভাজন নিশ্চিত করে এবং কর্মীদের সনাক্তকরণের ক্ষমতা উন্নত করে, অনুপযুক্ত পরীক্ষাগার অপারেশনের কারণে মিথ্যা নেতিবাচক হ্রাস করা সম্ভব।

সেরে ও মুক্ত হওয়া রোগীদের SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষার পুনরায় পরীক্ষা পজিটিভ হওয়ার কারণ

"COVID-19 রোগ নির্ণয় এবং চিকিত্সা পরিকল্পনা (ট্রায়াল সপ্তম সংস্করণ)" স্পষ্টভাবে উল্লেখ করেছে যে COVID-19 রোগীদের সুস্থ ও হাসপাতাল থেকে ছেড়ে দেওয়ার জন্য একটি মানদণ্ড হল যে পরপর দুটি শ্বাসযন্ত্রের নমুনাগুলির একটি নেতিবাচক নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষা রয়েছে (অন্তত 24 ঘন্টার ব্যবধানে), তবে সেখানে SA-2-এর জন্য খুব কম সংখ্যক রোগীর আবার SAV-2-এর পজিটিভ অ্যাসিড পরীক্ষা করা হয়েছে। কারণ

(1) SARS-CoV-2 একটি নতুন ভাইরাস।এর প্যাথোজেনিক প্রক্রিয়া, সৃষ্ট রোগের সম্পূর্ণ চিত্র এবং রোগের কোর্সের বৈশিষ্ট্যগুলি আরও বোঝা প্রয়োজন।অতএব, একদিকে, ডিসচার্জ রোগীদের ব্যবস্থাপনা জোরদার করা এবং 14 দিনের চিকিৎসা পর্যবেক্ষণ পরিচালনা করা প্রয়োজন।রোগের সংঘটন, বিকাশ এবং ফলাফলের পুরো প্রক্রিয়াটি বোঝার জন্য ফলো-আপ, স্বাস্থ্য পর্যবেক্ষণ এবং স্বাস্থ্য নির্দেশিকা পরিচালনা করুন।

(২) রোগী আবারও ভাইরাসে আক্রান্ত হতে পারে।শিক্ষাবিদ ঝং নানশান বলেছেন: যেহেতু নিরাময় রোগীদের অ্যান্টিবডি থাকে, তাই SARS-CoV-2 আবার আক্রমণ করলে অ্যান্টিবডি দ্বারা নির্মূল করা যায়।অনেক কারণ আছে, যা সুস্থ হওয়া রোগীর কারণ হতে পারে, বা এটি ভাইরাসের মিউটেশনের সাথে সম্পর্কিত হতে পারে, এমনকি ল্যাবরেটরি পরীক্ষার কারণও হতে পারে।যদি এটি নিজেই ভাইরাস হয়, তাহলে SARS-CoV-2 মিউটেশনের ফলে পুনরুদ্ধার হওয়া রোগীর দ্বারা উত্পাদিত অ্যান্টিবডি মিউটেটেড ভাইরাসের বিরুদ্ধে অকার্যকর হতে পারে।রোগী আবার মিউটেটেড ভাইরাসে আক্রান্ত হলে নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষা আবার পজিটিভ হতে পারে।

(3) যতদূর পরীক্ষাগার পরীক্ষার পদ্ধতি উদ্বিগ্ন, প্রতিটি পরীক্ষার পদ্ধতির সীমাবদ্ধতা রয়েছে।SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ জিনের ক্রম পছন্দ, রিএজেন্টের সংমিশ্রণ, পদ্ধতির সংবেদনশীলতা এবং অন্যান্য কারণে হয়, যার ফলে বিদ্যমান কিটগুলির নিজস্ব কম সনাক্তকরণ সীমা রয়েছে।রোগীর চিকিৎসার পর শরীরে ভাইরাস কমে যায়।যখন পরীক্ষা করা হবে নমুনায় ভাইরাল লোড সনাক্তকরণের নিম্ন সীমার নিচে, একটি "নেতিবাচক" ফলাফল প্রদর্শিত হবে।যাইহোক, এই ফলাফলের মানে এই নয় যে শরীর থেকে ভাইরাস সম্পূর্ণরূপে অদৃশ্য হয়ে গেছে।চিকিৎসা বন্ধ হওয়ার পর ভাইরাস হতে পারে।পুনরুত্থান”, অনুলিপি চালিয়ে যান।অতএব, স্রাবের পর 2 থেকে 4 সপ্তাহের মধ্যে সপ্তাহে একবার পর্যালোচনা করার পরামর্শ দেওয়া হয়।

(4) নিউক্লিক অ্যাসিড হল ভাইরাসের জেনেটিক উপাদান।রোগীর অ্যান্টিভাইরাল চিকিত্সার পরে ভাইরাসটি মারা যায়, তবে অবশিষ্ট ভাইরাল আরএনএ টুকরোগুলি এখনও মানবদেহে রয়ে যায় এবং শরীর থেকে সম্পূর্ণরূপে নিঃসৃত হয় না।কখনও কখনও, নির্দিষ্ট পরিস্থিতিতে, এটি আরও ধরে রাখা যেতে পারে।একটি দীর্ঘ সময়, এবং এই সময়ে নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষা "ক্ষণস্থায়ী" ইতিবাচক হবে।রোগীর পুনরুদ্ধারের সময় বাড়ানোর সাথে সাথে, দেহের অবশিষ্ট RNA খণ্ডগুলি ধীরে ধীরে নিঃশেষ হয়ে যাওয়ার পরে, নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষার ফলাফল নেতিবাচক হতে পারে।

(5) SARS-CoV-2-এর নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষার ফলাফল শুধুমাত্র ভাইরাল RNA-এর উপস্থিতি বা অনুপস্থিতি প্রমাণ করে এবং ভাইরাসের কার্যকলাপ এবং ভাইরাস সংক্রমণযোগ্য কিনা তা প্রমাণ করতে পারে না।যে রোগীর নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষা আবার পজিটিভ হয়েছে সে আবার সংক্রমণের উৎস হয়ে উঠবে কিনা তা প্রমাণ করতে হবে।ক্লিনিকাল নমুনাগুলিতে ভাইরাস সংস্কৃতি চালানো এবং এটি সংক্রামক প্রমাণ করার জন্য একটি "লাইভ" ভাইরাস চাষ করা প্রয়োজন।

সারসংক্ষেপ

সারসংক্ষেপে, SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষা মিথ্যা নেতিবাচক, পুনরায় পরীক্ষা ইতিবাচক, এবং অন্যান্য অবস্থা যা ক্লিনিকাল প্রকাশের সাথে অসঙ্গতিপূর্ণ তা সম্পূর্ণরূপে এড়ানো যায় না।প্রকৃত স্ক্রীনিং এবং পরীক্ষায়, মিস ডায়াগনোসিস এবং ভুল নির্ণয় রোধ করতে ব্যাপক রোগ নির্ণয়ের জন্য ক্লিনিকাল লক্ষণ, ইমেজিং পরীক্ষা (CT) এবং পরীক্ষাগার পরীক্ষা (নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষা + ভাইরাস-নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি পরীক্ষা) ফলাফল একত্রিত করার সুপারিশ করা হয়।যদি পরীক্ষার ফলাফলগুলি ক্লিনিকাল প্রকাশের সাথে স্পষ্টতই অসঙ্গতিপূর্ণ বলে পাওয়া যায়, তাহলে SARS-CoV-2 ভাইরাসের প্রারম্ভিক সংক্রমণ, পুনরাবৃত্ত সংক্রমণ বা অন্যান্য সম্ভাব্য ভাইরাস সংক্রমণ ইত্যাদির সাথে মিলিত হওয়ার জন্য সম্পূর্ণ পরীক্ষার লিঙ্কের (নমুনা সংগ্রহ, সঞ্চালন এবং প্রক্রিয়াকরণ লিঙ্ক) একটি ব্যাপক বিশ্লেষণ পরিচালনা করার পরামর্শ দেওয়া হয়।যদি শর্ত অনুমতি দেয়, তাহলে পুনরায় পরীক্ষার জন্য থুতু বা অ্যালভিওলার ল্যাভেজ ফ্লুইডের মতো আরও সংবেদনশীল নমুনা সংগ্রহ করার পরামর্শ দেওয়া হয়।

সংশ্লিষ্ট পণ্য:

SARS-CoV-2 নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ কিট (মাল্টিপ্লেক্স পিসিআর ফ্লুরোসেন্ট প্রোব পদ্ধতি)