ফরডাইরেক্ট RT-qPCR কিট
বর্ণনা
ForeDirect RT-qPCR কিট RNA পরিশোধন প্রক্রিয়া ছাড়াই সোয়াব সংগ্রহ থেকে RNA সরাসরি রিয়েল-টাইম পরিবর্ধনের জন্য ডিজাইন করা হয়েছে।এই কিটটি এক ঘন্টার মধ্যে qRT-PCR চক্রগুলি সম্পূর্ণ করে।এনজাইম মিশ্রণটি রিভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেজ, হট-স্টার্ট টাক ডিএনএ পলিমারেজ, RNase ইনহিবিটরের একটি অপ্টিমাইজ করা মিশ্রণ।রিঅ্যাকশন বাফারে অপ্টিমাইজড বাফার কম্পোনেন্ট, এমজি সহ প্রয়োজনীয় সমস্ত উপাদান থাকে2+, dUTP, এবং dNTPs।
স্পেসিফিকেশন
100T
কিট উপাদান
নিউক্লিক অ্যাসিড রিলিজ এজেন্ট |
আরএনএ রক্ষাকারী |
2× RT-qPCR বাফার |
এনজাইম মিশ্রণ (Taq&M-MLV) |
নির্দেশনা |
পিসিআর অ্যাপ্লিকেশন
1. একবার পিসিআর প্রতিক্রিয়া টিউবগুলি সংক্ষিপ্তভাবে সেন্ট্রিফিউজ হয়ে গেলে, সেগুলিকে পরিবর্ধন যন্ত্রের নমুনা ট্যাঙ্কে রাখুন।
2. তাপীয় প্রোটোকল
ধাপ | তাপমাত্রা | সময় | সাইকেল | |
1 | বিপরীত প্রতিলিপি | 50℃ | 15 মিনিট | 1 |
2 | প্রি-ডেনেচুরেশন | 95℃ | 1 মিনিট | 1 |
3 | বিকৃতকরণ | 95℃ | 10 সেকেন্ড | 42 |
4 | অ্যানিল/এক্সটেনশন | 60℃ | 30 সেকেন্ড |
বিঃদ্রঃ:প্রতিটি চক্রের এক্সটেনশন ধাপের পরপরই ফ্লুরোসেন্ট সংকেত সনাক্ত করা হয়েছিল।
3. সেট করার পরে, ফাইলটি সংরক্ষণ করুন এবং প্রতিক্রিয়া প্রোগ্রাম চালান।
অপারেটিং পদক্ষেপ
বিকারক প্রস্তুত করার আগে, কিটের সমস্ত বিকারকগুলি ঘরের তাপমাত্রায় গলাতে হবে এবং আলতোভাবে মিশ্রিত করতে হবে।
বিকারক প্রস্তুতি
1. নিউক্লিক অ্যাসিড রিলিজ মিক্স প্রস্তুত করুন
উপাদান | নমুনা বা নিয়ন্ত্রণ প্রতি ভলিউম |
নিউক্লিক অ্যাসিড রিলিজ এজেন্ট | 5μL |
আরএনএ রক্ষাকারী | 0.5 μL |
2. প্রতিক্রিয়া মিশ্রণ প্রস্তুত করুন
উপাদান | নমুনা বা নিয়ন্ত্রণ প্রতি ভলিউম |
2× RT-qPCR বাফার | 15 μL |
এনজাইম মিশ্রণ (Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
প্রাইমার এবং প্রোব | 1μL |
স্টোরেজ এবং শেলফ লাইফ
-কিটটি -20 এ সংরক্ষণ করা উচিত± 5℃.বৈধতার সময়কাল 12 মাস।
-পুনরাবৃত্ত ফ্রিজ-থাও চক্র (<5 চক্র) এড়িয়ে চলুন।