বুকাল সোয়াব/এফটিএ কার্ড ডিএনএ আইসোলেশন কিট জিনোমিক ডিএনএ এক্সট্রাকশন বা বুকাল সোয়াব থেকে পিউরিফিকেশন কিট
কিট বর্ণনা:
বুকাল সোয়াব/এফটিএ কার্ডের নমুনা থেকে উচ্চ-মানের জিনোমিক ডিএনএ দ্রুত বিশুদ্ধ করুন।
◮RNase দূষণ নেই:কিট দ্বারা প্রদত্ত ডিএনএ-অনলি কলামটি পরীক্ষার সময় RNase যোগ না করেই জিনোমিক ডিএনএ থেকে RNA অপসারণ করা সম্ভব করে তোলে, পরীক্ষাগারকে বহির্মুখী RNase দ্বারা দূষিত হতে বাধা দেয়।
◮দ্রুত গতি:ফোরজিন প্রোটিজে অনুরূপ প্রোটিসের চেয়ে বেশি কার্যকলাপ রয়েছে এবং টিস্যুর নমুনা দ্রুত হজম করে;অপারেশনটি সহজ, এবং জিনোমিক ডিএনএ নিষ্কাশন অপারেশন 20-80 মিনিটের মধ্যে সম্পন্ন করা যেতে পারে।
◮সুবিধাজনক:সেন্ট্রিফিউগেশন ঘরের তাপমাত্রায় সঞ্চালিত হয়, এবং ডিএনএ-এর 4°C কম-তাপমাত্রার সেন্ট্রিফিউগেশন বা ইথানল বৃষ্টিপাতের প্রয়োজন নেই।
◮নিরাপত্তা:কোন জৈব বিকারক নিষ্কাশন প্রয়োজন হয় না.
◮উচ্চ গুনসম্পন্ন:নিষ্কাশিত জিনোমিক ডিএনএ-তে বড় টুকরো, আরএনএ নেই, আরএনএস নেই এবং অত্যন্ত কম আয়ন সামগ্রী রয়েছে, যা বিভিন্ন পরীক্ষার প্রয়োজনীয়তা পূরণ করতে পারে।
◮মাইক্রো-ইলুশন সিস্টেম:এটি জিনোমিক ডিএনএ-র ঘনত্ব বাড়াতে পারে, যা ডাউনস্ট্রিম সনাক্তকরণ বা পরীক্ষার জন্য সুবিধাজনক।
বর্ণনা
এই কিটটি বুকাল সোয়াব এবং এফটিএ কার্ড (রক্তের দাগ) থেকে উচ্চ-ঘনত্ব জিনোমিক ডিএনএ পাওয়ার জন্য একটি কার্যকর এবং দ্রুত পদ্ধতি প্রদান করে।আমাদের কোম্পানি ব্যবহার করে's অনন্য ডিএনএ-কেবল সিলিকা মেমব্রেন স্পিন কলাম এবং ফর্মুলা, ফোরজিন প্রোটিজের সাথে মিলিত, উচ্চ-ঘনত্ব, উচ্চ-মানের জিনোমিক ডিএনএ 80 মিনিটের মধ্যে বের করা যেতে পারে।বিশেষভাবে ডিজাইন করা ছোট পরিশোধন কলাম জিনোমিক ডিএনএকে আবদ্ধ করে এবং ডিএনএকে অল্প পরিমাণে (15μl) প্রাপ্ত জিনোমিক ডিএনএর ঘনত্ব বাড়ানোর জন্য ইলুশন সিস্টেম, যা ডাউনস্ট্রিম সনাক্তকরণ বা পরীক্ষার জন্য সুবিধাজনক।কিটটি একবারে এক বা একাধিক নমুনা প্রক্রিয়া করতে পারে এবং পরিশোধন প্রক্রিয়ার জন্য জৈব পদার্থ যেমন ফেনল, ক্লোরোফর্ম, এবং সময়-সাপেক্ষ আইসোপ্রোপ্যানল বা ইথানল বৃষ্টিপাতের প্রয়োজন হয় না এবং অপারেশনটি সহজ এবং সময় সাশ্রয়ী।
স্পেসিফিকেশন
50 প্রস্তুতি
কিট উপাদান
| বাফার ST1 |
| বাফার ST2 |
| লিনিয়ার অ্যাক্রিলামাইড |
| বাফার PW |
| বাফার WB |
| বাফার ইবি |
| ফরজিন প্রোটিজ |
| DNA-শুধু কলাম |
| নির্দেশনা |
বৈশিষ্ট্য ও সুবিধা
-কোনো RNase দূষণ নয়: কিট দ্বারা প্রদত্ত ডিএনএ-অনলি কলাম পরীক্ষার সময় RNase যোগ না করেই জিনোমিক DNA থেকে RNA অপসারণ করা সম্ভব করে, পরীক্ষাগারকে বহির্মুখী RNase দ্বারা দূষিত হওয়া থেকে এড়িয়ে যায়।
-দ্রুত গতি: ফোরজিন প্রোটিজে অনুরূপ প্রোটিসের চেয়ে বেশি কার্যকলাপ রয়েছে, নমুনাগুলি দ্রুত হজম করে;সহজ অপারেশন।
-সুবিধাজনক: সেন্ট্রিফিউগেশন ঘরের তাপমাত্রায় সঞ্চালিত হয়, এবং DNA-এর 4°C কম-তাপমাত্রার সেন্ট্রিফিউগেশন বা ইথানল বৃষ্টিপাতের প্রয়োজন নেই।
-নিরাপত্তা: কোন জৈব বিকারক নিষ্কাশন প্রয়োজন হয় না.
-উচ্চ গুণমান: নিষ্কাশিত জিনোমিক ডিএনএ-তে বড় টুকরো, আরএনএ নেই, আরএনএস নেই এবং অত্যন্ত কম আয়ন সামগ্রী রয়েছে, যা বিভিন্ন পরীক্ষার প্রয়োজনীয়তা পূরণ করতে পারে।
-মাইক্রো-ইলুশন সিস্টেম: এটি জিনোমিক ডিএনএর ঘনত্ব বাড়াতে পারে, যা ডাউনস্ট্রিম সনাক্তকরণ বা পরীক্ষার জন্য সুবিধাজনক।
কিট অ্যাপ্লিকেশন
এটি নিম্নলিখিত নমুনাগুলি থেকে জিনোমিক ডিএনএ শুদ্ধ করার জন্য উপযুক্ত: বুকাল সোয়াবস, এফটিএ কার্ড (রক্তের দাগ)।
স্টোরেজ এবং শেলফ লাইফ
-এই কিটটি 12 মাসের জন্য শুষ্ক অবস্থায় ঘরের তাপমাত্রায় (15-25°C) সংরক্ষণ করা যেতে পারে;যদি এটি দীর্ঘ সময়ের জন্য সংরক্ষণ করার প্রয়োজন হয় তবে এটি 2-8 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করা যেতে পারে।
দ্রষ্টব্য: কম তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হলে, দ্রবণটি বৃষ্টিপাতের ঝুঁকিপূর্ণ।ব্যবহারের আগে, একটি নির্দিষ্ট সময়ের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় কিটটিতে সমাধানটি রাখতে ভুলবেন না।প্রয়োজনে, এটিকে 37°C জলের স্নানে 10 মিনিটের জন্য প্রিহিট করে রেসিপিটেট দ্রবীভূত করুন এবং ব্যবহারের আগে এটি মেশান৷
-ফোরজিন প্রোটিজ দ্রবণের একটি অনন্য সূত্র রয়েছে, যা দীর্ঘ সময়ের জন্য (3 মাস) ঘরের তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হলে সক্রিয় থাকে;4 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করা হলে এটির কার্যকলাপ এবং স্থিতিশীলতা আরও ভাল হবে, তাই এটি 4 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করার পরামর্শ দেওয়া হয়, মনে রাখবেন এটি -20 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় রাখবেন না।
পরিশোধন কলাম আটকে আছে
এই কিটে, জিনোমিক ডিএনএ নিষ্কাশন অপারেশনে, বিশুদ্ধকরণ কলামটি সেন্ট্রিফিউগেশন ধাপ ছাড়াই নমুনা এনজাইমেটিক লাইসিস মিশ্রণে সরাসরি শোষিত হয় এবং অসম্পূর্ণ এনজাইমাইজেশন এবং নমুনার উচ্চ সান্দ্রতার কারণে পরিশোধন কলামটি ব্লক হয়ে যেতে পারে।
নিম্নলিখিত সম্ভাব্য কারণগুলি নিম্নরূপ:
1. টিস্যুর নমুনার অসম্পূর্ণ এনজাইমেটিক হজম।
প্রস্তাবনা: ফোরজিন প্রোটিজের নমুনা প্রক্রিয়াকরণের সময় যথাযথভাবে বাড়ানো যেতে পারে বা 5 মিনিটের জন্য 12,000 rpm (~13,400 × g) সেন্ট্রিফিউগেশনের পরে সুপারনাট্যান্ট নেওয়া যেতে পারে।
2. টিস্যুর নমুনা বা বড় টিস্যুর অত্যধিক ব্যবহার।
সুপারিশ: নমুনায় 1 বুকল সোয়াব অতিক্রম না করাই ভালো;নমুনাটি খুব বড় হলে, সেই অনুযায়ী বাফার ST1, Foregene Protease, বাফার ST2 এর ডোজ বাড়ান।
3. নমুনা সান্দ্রতা খুব বেশী.
সুপারিশ: জিনোমিক ডিএনএ নিষ্কাশনের আগে নমুনাগুলিকে 10 মিমি Tris-HCl দিয়ে যথাযথভাবে পাতলা করা যেতে পারে।
4. রক্তের কার্ডের টুকরো চুষে নেওয়া হয়েছে।
সুপারিশ: ব্লাড স্পট (এফটিএ কার্ড) জিনোমিক নিষ্কাশনের ধাপ 6 এর ক্ষণস্থায়ী সেন্ট্রিফিউগেশন সময় যথাযথভাবে বাড়ানো যেতে পারে।
কম ফলন বা ডিএনএ নেই
নমুনার উৎপত্তি, নমুনা সংরক্ষণের অবস্থা, নমুনা তৈরি, ম্যানিপুলেশন ইত্যাদি সহ জিনোমিক ডিএনএ ফলনকে প্রভাবিত করে এমন বিভিন্ন কারণ রয়েছে।
নিষ্কাশনের সময় জিনোমিক ডিএনএ পাওয়া যাবে না
সম্ভাব্য কারণগুলি নিম্নরূপ:
1. নমুনাগুলির অনুপযুক্ত সংরক্ষণ বা খুব বেশি সময় ধরে স্টোরেজ জিনোমিক ডিএনএ অবক্ষয়ের দিকে পরিচালিত করে।
সুপারিশ: ওরাল swabs পছন্দ করে তাজা নমুনা করা উচিত, এবং এটি জিনোমিক DNA নিষ্কাশন অপারেশন জন্য সংরক্ষিত swabs ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয় না;রক্তের দাগের নমুনাগুলি নিশ্চিত করা উচিত যে গুণমানটি যোগ্য এবং স্টোরেজ সময় খুব বেশি দীর্ঘ হওয়া উচিত নয়।
2. খুব কম টিস্যু ব্যবহারের ফলে সংশ্লিষ্ট জিনোমিক ডিএনএ নিষ্কাশন না হতে পারে।
সুপারিশ: অপারেশন গাইডে দেওয়া বুকাল সোয়াব স্যাম্পলিং নির্দেশাবলী অনুসরণ করুন এবং যতবার সম্ভব মুছুন যাতে জিনোমিক ডিএনএ নিষ্কাশনের জন্য ওরাল সোয়াবের সাথে পর্যাপ্ত কোষ সংযুক্ত করা যায়;রক্তের দাগ নমুনা নিষ্কাশনের জন্য, রক্তের দাগ কাটা এলাকা যথাযথভাবে বৃদ্ধি করা যেতে পারে।
3. Foregene Protease অনুপযুক্তভাবে সংরক্ষিত হয়, যার ফলে এর কার্যকলাপ বা নিষ্ক্রিয়তা হ্রাস পায়।
সুপারিশ: ফোরজিন প্রোটিজের স্টোরেজ শর্তগুলি নিশ্চিত করুন বা এনজাইমেটিক প্রতিক্রিয়ার জন্য এটিকে একটি নতুন ফোরজিন প্রোটিজ দিয়ে প্রতিস্থাপন করুন।
4. কিটটির অনুপযুক্ত সংরক্ষণ বা স্টোরেজ সময় খুব দীর্ঘ, ফলে কিটের কিছু উপাদান ব্যর্থ হয়।
সুপারিশ: সম্পর্কিত পদ্ধতির জন্য একটি নতুন Buccal swab DNA আইসোলেশন কিট কিনুন।
5. বাফার WB পরম ইথানল যোগ করে না।
সুপারিশ: নিশ্চিত করুন যে বাফার WB পরম ইথানলের সঠিক ভলিউম যোগ করে।
6. সিলিকন ফিল্মে ইলুয়েন্ট সঠিকভাবে যোগ করা হয় না।
প্রস্তাবনা: সিলিকন ঝিল্লির মাঝখানে 65 ডিগ্রি সেলসিয়াস প্রাক-উষ্ণ ইলুয়েন্ট ড্রপ যোগ করুন এবং ইলুশন দক্ষতা বাড়ানোর জন্য ঘরের তাপমাত্রায় 5 মিনিটের জন্য রেখে দিন।
কম ফলন জিনোমিক ডিএনএ বিচ্ছিন্ন
নিম্নলিখিত সম্ভাব্য কারণগুলি নিম্নরূপ:
1. নমুনাগুলির অনুপযুক্ত সংরক্ষণ বা খুব বেশি সময় ধরে স্টোরেজ জিনোমিক ডিএনএ অবক্ষয়ের দিকে পরিচালিত করে।
প্রস্তাবনা: মৌখিক সোয়াবগুলি পছন্দ করে নতুনভাবে নমুনা নেওয়া হয় এবং সংরক্ষিত সোয়াবগুলি জিনোমিক ডিএনএ নিষ্কাশনের জন্য ব্যবহার করা উচিত নয়।
2. টিস্যুর নমুনার পরিমাণ খুব কম হলে, নিষ্কাশিত জিনোমিক ডিএনএ সামগ্রী কম হবে।
সুপারিশ: অপারেটিং গাইডে মৌখিক স্যাম্প স্যাম্পলিং নির্দেশাবলী অনুসরণ করুন, যতবার সম্ভব মুছুন যাতে জিনোমিক ডিএনএ নিষ্কাশনের জন্য ওরাল সোয়াবের সাথে পর্যাপ্ত কোষ সংযুক্ত করা যায়।
3. Foregene Protease অনুপযুক্তভাবে সংরক্ষিত হয়, যার ফলে এর কার্যকলাপ বা নিষ্ক্রিয়তা হ্রাস পায়।
সুপারিশ: ফোরজিন প্রোটিজের স্টোরেজ শর্তগুলি নিশ্চিত করুন বা এনজাইমেটিক প্রতিক্রিয়ার জন্য এটিকে একটি নতুন ফোরজিন প্রোটিজ দিয়ে প্রতিস্থাপন করুন।
4. Eluent সমস্যা.
সুপারিশ: ইলুশনের জন্য বাফার ইবি ব্যবহার করুন;ddH ব্যবহার করলে2O বা অন্যান্য eluents, নিশ্চিত করুন যে eluate এর pH 7.0-8.5 এর মধ্যে।
5. ইলুয়েট সঠিকভাবে ড্রপওয়াইজে যোগ করা হয়নি।
সুপারিশ: সিলিকন ঝিল্লির মাঝখানে ইলুয়েন্ট ড্রপ যোগ করুন এবং ইলুশন দক্ষতা বাড়াতে ঘরের তাপমাত্রায় 5 মিনিট রেখে দিন।
6. ইলুশন তরল খুব কম জমা হয়।
সুপারিশ: নির্দেশাবলীতে প্রয়োজন অনুযায়ী জিনোমিক ডিএনএ ইলুশনের জন্য ইলুয়েন্ট ব্যবহার করুন, কমপক্ষে 15 μl এর কম নয়।
জিনোমিক ডিএনএ বিচ্ছিন্নতার কম বিশুদ্ধতা
কম জিনোমিক ডিএনএ বিশুদ্ধতা ডাউনস্ট্রিম পরীক্ষাগুলির ব্যর্থতা বা অসন্তোষজনক ফলাফলের দিকে নিয়ে যেতে পারে, যেমন: এনজাইমগুলি খোলা যাবে না, পিসিআর আগ্রহের জিন খণ্ড পেতে পারে না ইত্যাদি।
সম্ভাব্য কারণগুলি নিম্নরূপ:
1. হেটেরোপ্রোটিন দূষণ, আরএনএ দূষণ।
বিশ্লেষণ: বাফার পিডব্লিউ ব্যবহার করে পরিশোধন কলাম ধোয়া হয়নি;বাফার পিডব্লিউ ওয়াশ পিউরিফিকেশন কলাম সঠিক সেন্ট্রিফিউগাল গতি ব্যবহার করে ধোয়া হয়নি।
সুপারিশ: ইথানল যোগ করার আগে সুপারন্যাট্যান্টে কোন বৃষ্টিপাত নেই তা নিশ্চিত করুন;নির্দেশাবলী অনুযায়ী পরিশোধন কলাম ধোয়া নিশ্চিত করুন, এবং এই ধাপটি বাদ দেওয়া যাবে না।
2. অপবিত্রতা আয়ন দূষণ।
বিশ্লেষণ: বাফার ডব্লিউবি ওয়াশ পরিশোধন কলাম বাদ দেওয়া হয়েছে বা শুধুমাত্র একবার ধুয়ে ফেলা হয়েছে, ফলে অবশিষ্ট আয়নিক দূষণ হয়েছে।
সুপারিশ: যতটা সম্ভব অবশিষ্ট আয়ন অপসারণের নির্দেশ অনুসারে বাফার WB 2 বার ধোয়া নিশ্চিত করুন।
3. আরএনএ এনজাইম দূষণ।
বিশ্লেষণ: বিদেশী RNase বাফার যোগ করা হয়েছে;বাফার পিডব্লিউ ওয়াশ অপারেশনটি ভুল ছিল, যার ফলে RNase অবশিষ্টাংশগুলি, ডাউনস্ট্রিম আরএনএ পরীক্ষামূলক ক্রিয়াকলাপগুলিকে প্রভাবিত করে, যেমন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশনে।
সুপারিশ: ফোরজিন সিরিজের নিউক্লিক অ্যাসিড আইসোলেশন কিট RNase এর অতিরিক্ত যোগ ছাড়াই RNA অপসারণ করতে পারে, এইভাবে buccal Swab/FTA কার্ড DNA আইসোলেশন কিট RNase যোগ করার দরকার নেই;Buffer PW ওয়াশিং পিউরিফিকেশন কলামের নির্দেশাবলী অনুসরণ করতে ভুলবেন না এবং এই ধাপটি বাদ দেওয়া যাবে না।
4. ইথানলের অবশিষ্টাংশ।
বিশ্লেষণ: বাফার ডব্লিউবি পরিশোধন কলাম ধোয়ার পরে খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশন করেনি।
সুপারিশ: নির্দেশাবলী অনুযায়ী সঠিক খালি টিউব সেন্ট্রিফিউগেশন অপারেশন সম্পাদন করুন।
5. অন্যান্য অপবিত্রতা দূষণ.
বিশ্লেষণ: সংরক্ষিত নমুনা বা বিশেষ নমুনা প্রিট্রিটেড করা হয় না।
সুপারিশ: নির্দেশিত হিসাবে নমুনাটি পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে প্রিট্রিট করুন।
